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一种提升宠物免疫力的零食配方的制作方法


1.本发明涉及宠物零食技术领域,具体涉及一种提升宠物免疫力的零食配方。

背景技术:

2.宠物作为一种与人类亲密接触的伴侣动物,对人类的心理健康有积极的作用,如缓解神经障碍、焦虑、抑郁,也可以缓解老年人的孤独。然而,宠物也是一些病原微生物的载体,由宠物引起和传播的抗生素耐药性传染病也导致公共安全隐患。宠物的抗病能力和健康状态将直接影响它们的主人和整个社会,因此,如何提升宠物免疫力也就成为宠物饲养亟需解决的问题。
3.为解决上述问题,目前多通过添加功能性活性物质来提高动物免疫力的研究已经进行了许多。如现有技术cn105076816b公布了一种宠物狗零食南瓜条及其制备方法,其通过将南瓜、土豆、玉米粉、淀粉、蔗糖、糖稀、酵母、复合乳酸菌、鸡胸肉、鸡腿肉、鸡肝、菜籽油和豆粕等原料,制备发酵宠物零食,不仅增加零食风味,而且有助于帮助宠物食物消化,利尿防便溺,提高免疫力。然而现有技术仍然存在如下缺点:1)现有技术制备所得的宠物零食对提升宠物免疫力的效果甚微或未知,因此其市场应用前景及实用性均较为欠缺,无法进行广泛推广;2)现有技术中多种原料,并以鸡肝中所含维生素c和微量元素硒作为提升免疫力的添加剂,导致其原料种类过多而显著提升宠物食品的制作成本;且其原料的来源并无特殊限定,对其中起关键作用的营养素种类和含量并不明确,使得制备所得零食不具有可复制性,无法广泛应用于市场;3)现有技术中的提升免疫力的宠物食品原料较多,针对不同原料的处理方法不同而需要采用各种大型设备;导致其制备工艺复杂,生产效率较低,且制作成本较高。
4.综上,目前市场上提升宠物免疫力的食品存在原料组成复杂、原料的处理工艺复杂、提升免疫力效果未知或较低等缺点。因此,研发一种成分简单、提升宠物免疫力效果好、便于市场化应用的的宠物零食,使得其可广泛应用于提升宠物免疫力而保证宠物健康状况,不仅有效弥补现有宠物零食的不足,还能对增强宠物抗病能力和降低宠物传染病具有重要意义。

技术实现要素:

5.本发明意在提供一种提升宠物免疫力的零食配方,以解决现有宠物零食配方提升宠物免疫力的效果甚微的技术问题。
6.为达到上述目的,本发明采用如下技术方案:一种提升宠物免疫力的零食配方,由营养素主料和辅料,所述辅料包括如下质量份数的原料:酪蛋白磷酸肽-硒络合物0.008~0.07份。
7.本方案的原理及优点是:1、相比于现有宠物零食提升宠物免疫力的效果甚微而言,本方案通过将酪蛋白磷
酸肽-硒络合物(cpp-se)添加至常规的宠物零食中并饲喂宠物一段时间,有效提升宠物体内淋巴细胞数量、免疫分子(血清il-4、il-6、igm和ifn-γ等),从而提升宠物免疫力。申请人通过长期实验发现,与未添加cpp-se的零食相比,添加了cpp-se的零食在喂食宠物30天后,有效提升宠物体内淋巴细胞数量、免疫分子(血清il-4、il-6、igm和ifn-γ等)的数量,具体提升3~8倍不等,从而有效提升宠物免疫力。
8.2、本方案中通过将酪蛋白磷酸肽(cpp)和硒(se)以络合物的形式组合应用,cpp不仅能有效促进宠物对se及其他营养元素的吸收作用,同时还能直接作用于免疫蛋白的表达过程中,提升宠物集体免疫表达,从而提升宠物免疫力。申请人通过实验发现,与未添加cpp-se的零食相比,添加了cpp-se的零食在喂食宠物30天后,可有效上调43种宠物体内的蛋白表达;通过对蛋白表达的富集分析(kegg富集分析),发现这些差异蛋白富集在自然杀伤细胞介导的细胞毒性、fcεri信号通路、肠道免疫网络的iga生产、nfkb信号通路、fcγr

介导的吞噬作用等与免疫相关的信号通路,以此提升宠物免疫力。
9.3、本方案中宠物零食配方简单,可采用常规主料与cpp-se搭配使用,即可实现宠物免疫力的提升,便于产业化生产提升宠物免疫力的零食,从而便于扩大方案所得零食的市场应用范围。
10.优选的,所述主料包括如下质量份数的原料:淀粉10~14份、单甘脂0.1~0.3份、碳酸钙0.3~0.7份、植物油0.1~0.3份、甘油2~4份、啤酒酵母粉0.03~0.1份、鱼粉0.1~0.5份、鸡肉0.5~2份、白糖0.5~0.8份、醋酸酯双淀粉0.5~0.8份、粗纤维0.5~0.8份、防腐剂0.02~0.06份、防霉剂0.01~0.04份、酸味剂0.05~0.1份、水3~ 4份。
11.有益效果:本方案通过将cpp-se和常规原料组合配成宠物零食,有效提升宠物喂养效果。方案中,cpp-se主要用于提升宠物免疫力,具体在于提升宠物体内免疫细胞数量和免疫因子表达通路;淀粉主要为宠物生长发育提供必要的营养;单甘脂则有效降低甘油的用量而降低宠物出现腹泻的概率;粗纤维则有效提升宠物肠道蠕动而帮助宠物消化,多组分组合有效提升零食的喂养效果,提升宠物免疫力。
12.优选的,所述淀粉包含如下质量份数的原料:豌豆淀粉1.5~2.5份、玉米淀粉1.5~2.5份、马铃薯淀粉1~2份、大米粉6~7份。
13.有益效果:本方案通过组合应用多种植物淀粉,有效提升零食的营养成分,为宠物生长发育提供充足的营养。
14.优选的,所述防腐剂为山梨酸钾。
15.有益效果:本方案采用山梨酸钾作为防腐剂,山梨酸钾通过与微生物酶系统的巯基结合从而破坏许多酶系统,其毒性更小,有效降低防腐剂对宠物喂养的影响。
16.优选的,所述防霉剂为丙酸钙。
17.有益效果:本方案采用丙酸钙作为防霉剂,不仅能放置零食腐败,其还能在宠物体内代谢而被宠物吸收,并为宠物提供生长发育所必需的钙,有效避免因其他防霉剂而产生的安全隐患,从而提升零食的食品安全。
18.优选的,所述酸味剂为一水柠檬酸。
19.有益效果:本方案采用一水柠檬酸作为酸味剂,以调节零食的口味;同时一水柠檬酸具有抗氧化性使其还具有调味剂及防腐剂、保鲜剂的作用,有效提升零食的口味及延长零食保质期。
20.优选的,包括如下质量份数的原料:豌豆淀粉 2 份、玉米淀粉 2 份、马铃薯淀粉 1.5 份、大米粉 6.5 份、单甘脂 0.2 份、碳酸钙 0.5 份、植物油 0.2 份、甘油 3 份、啤酒酵母粉 0.05 份、鱼粉 0.2 份、鸡肉 1 份、白糖 0.6 份、醋酸酯双淀粉 0.6 份、粗纤维 0.6 份、山梨酸钾 0.04 份、丙酸钙 0.02 份、一水柠檬酸 0.08 份、水 3.6 份、酪蛋白磷酸肽-硒络合物 0.008 份。
21.有益效果:本方案通过组合添加植物淀粉,以丰富的营养元素组成进行科学配比,可有效降低原料种类及各种类用量,从而降低原料成本。
附图说明
22.图1为本发明实施例1~3、对比例1~2中淋巴细胞数量变化对比图。
23.图2为本发明实施例1和对比例2中宠物全血表达异常蛋白的细节对比图。
24.图3为本发明实施例1和对比例2中宠物全血表达异常蛋白的数量对比图。
具体实施方式
25.下面通过具体实施方式进一步详细说明,但本发明的实施方式不限于此。若未特别指明,下述实施例所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段;所用的实验方法均为常规方法;所用的材料、试剂等,均可从商业途径得到。
26.以具体实施例展示一种提高宠物基础免疫力的零食及其制备方法和应用。其中实施例1~3展示添加不同cpp-se所得提升宠物免疫力的零食配方,对比例1展示添加较少cpp-se所得提升宠物免疫力的零食配方、对比例2展示未添加cpp-se所得提升宠物免疫力的零食配方;实施例1~3、对比例1~2中提升宠物免疫力的零食配方的cpp-se掺杂比例如表1所示。以实施例1为例,说明本方案中提升宠物免疫力的零食配方。
27.实施例1本实施例基本如图1所示:一种提升宠物免疫力的零食配方,由营养素主料和辅料,辅料包括如下质量份数的原料:酪蛋白磷酸肽-硒络合物0.008~0.07份;主料包括如下质量份数的原料:淀粉10~14份、单甘脂0.1~0.3份、碳酸钙0.3~0.7份、植物油0.1~0.3份、甘油2~4份、啤酒酵母粉0.03~0.1份、鱼粉0.1~0.5份、鸡肉0.5~2份、白糖0.5~0.8份、醋酸酯双淀粉0.5~0.8份、粗纤维0.5~0.8份、防腐剂0.02~0.06份、防霉剂0.01~0.04份、酸味剂0.05~0.1份、水3~ 4份。其中,淀粉包含如下质量份数的原料:豌豆淀粉1.5~2.5份、玉米淀粉1.5~2.5份、马铃薯淀粉1~2份、大米粉6~7份;防腐剂为山梨酸钾;防霉剂为丙酸钙;酸味剂为一水柠檬酸。
28.本实施例具体包括如下质量份数的原料:豌豆淀粉 2 份、玉米淀粉 2 份、马铃薯淀粉 1.5 份、大米粉 6.5 份、单甘脂 0.2 份、碳酸钙 0.5 份、植物油 0.2 份、甘油 3 份、啤酒酵母粉 0.05 份、鱼粉 0.2 份、鸡肉 1 份、白糖 0.6 份、醋酸酯双淀粉 0.6 份、粗纤维 0.6 份、山梨酸钾 0.04 份、丙酸钙 0.02 份、一水柠檬酸 0.08 份、水 3.6 份、cpp-se 0.008 份。
29.对比例2本对比例与实施例1的区别在于,缺少cpp-se ,具体包括如下质量份数的原料:豌豆淀粉 2 份、玉米淀粉 2 份、马铃薯淀粉 1.5 份、大米粉 6.5 份、单甘脂 0.2 份、碳酸
钙 0.5 份、植物油 0.2 份、甘油 3 份、啤酒酵母粉 0.05 份、鱼粉 0.2 份、鸡肉 1 份、白糖 0.6 份、醋酸酯双淀粉 0.6 份、粗纤维 0.6 份、山梨酸钾 0.04 份、丙酸钙 0.02 份、一水柠檬酸 0.08 份、水 3.6 份。
30.本方案通过组合应用多种植物淀粉,有效提升零食的营养成分,为宠物生长发育提供充足的营养;以丰富的营养元素组成进行科学配比,还可有效降低原料种类及各种类用量,从而降低原料成本。本方案采用山梨酸钾作为防腐剂,山梨酸钾通过与微生物酶系统的巯基结合从而破坏许多酶系统,其毒性更小,有效降低防腐剂对宠物喂养的影响。本方案采用丙酸钙作为防霉剂,不仅能放置零食腐败,其还能在宠物体内代谢而被宠物吸收,并为宠物提供生长发育所必需的钙,有效避免因其他防霉剂而产生的安全隐患,从而提升零食的食品安全。本方案采用一水柠檬酸作为酸味剂,以调节零食的口味;同时一水柠檬酸具有抗氧化性使其还具有调味剂及防腐剂、保鲜剂的作用,有效提升零食的口味及延长零食保质期。
31.表1实施例1~3、对比例1~2中提升宠物免疫力的零食配方的cpp-se掺杂比例将本方案的零食配方按照常规零食制备方法烘烤定型为小块状零食,并将本方案制备零食和主食(够购买自江苏协和股份有限公司;包含营养如下:蛋白质为25.95%,脂肪为4.88%,纤维为3.32%,4037mekcal/kg)搭配喂养;具体喂养方式如下:(1)宠物选择:每组选择10只比格犬(5公5母,1岁,平均体重12公斤);(2)主食与零食搭配用量:主食130g/次+零食(实施例1~3、对比例1~2中任一种)30g/次;(3)喂养规律:每天主食喂食两次(上午9:00和下午15:00),零食饲喂时间为主食饲喂2h后,并提供充足的水。
32.(4)检测规律:喂养试验期为30d,饲喂前一天为第0天,分别于10d、20d、30d采集全部样品;每次采样前记录各组犬的体重。
33.实验例1:饲喂不同零食对宠物淋巴细胞数量的影响在早上喂食前,对喂养实施例1~3、对比例1~2的10只比格犬进行前肢静脉采血;采集1mledta-k2抗凝血血常规(迈瑞,深圳)分析,检测免疫细胞数量,包括淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞,结果以平均值
±
标准差表示,实施例1~3、对比例1~2的淋巴细胞检测结果详见表2和图1;实施例1、对比例2的单核细胞和中性粒细胞检测结果差异详见表3。
34.表2实施例1~3、对比例1~2中零食对宠物淋巴细胞数量的影响
实验数据表明,采用本方案零食配方制备所得零食组合饲喂宠物后,有效提升宠物体内淋巴细胞含量,且随着cpp-se浓度的变化呈现先上升后下降的趋势,在实施例1中的cpp-se添加量下,淋巴细胞数量变化最为显著。具体为,相比于采用对比例1~2中零食配方组合喂养比格犬后淋巴细胞数量变化不显著而言,采用实施例1~3中零食配方组合喂养宠物10d、20d时血淋巴细胞数量明显增加,喂养30d时则保持相对较高水平,显著提升比格犬的免疫力。
35.表3实施例1、对比例2中零食对宠物单核细胞、中性粒细胞数量的影响实验数据表明,采用本方案零食配方制备所得零食组合饲喂宠物后,其对宠物体内的单核细胞、中性粒细胞数量影响不大。
36.实验例2:饲喂不同零食对宠物免疫因子水平的影响对实施例1、对比例2的10只比格犬取1ml血液于不含抗凝剂的离心管中,室温放置1h后,4℃下3000rpm离心10min,最后将血清倒入ep管中,保存于20℃下,采用相应的酶联免疫吸附试验(elisa)试剂盒(凡可实业有限公司)检测血清中il-4、il-6、igm、igg、ifn-γ含量,结果以平均值
±
标准差表示,实施例1、对比例2的免疫因子水平检测结果差异详见表4。
37.表4实施例1、对比例2中零食对宠物免疫因子水平的影响注:小写字母代表p《0.05;大些字母代表p《0.01。
38.实验数据表明,除igg外,血清il-4、il-6、免疫球蛋白m(igm)和ifn-γ均显著升高。
39.具体为,饲养10d的实施例1中igm水平与对比例2无显著差异(p》0.05),igm含量显著增加(p《0.01),饲喂20d和30d后,各组igg水平无显著变化(p》0.05)。饲养10d时,实施例1中血清il-6显著高于对比例2(p《0.05),在喂养20d和30d期间,这一趋势持续(p《0.01)。实施例1中il-4水平显著高于对比例2。此外,与对比例2相比,实施例1的ifn-γ水平在10d时没有显著差异(p》0.05),但在20d时显著升高(p《0.05)。
40.另外,igm、il-4和ifn-γ水平随着饲喂时间的增加而逐渐升高。除10d时的igm外,其余各时间点的细胞因子水平均显著高于0d时(p《0.05)。血清igg含量无明显变化(p》0.05),il-6水平显著升高(p《0.05),在第20d达到峰值,30d逐渐下降。
41.实验例3:饲喂不同零食对宠物蛋白表达的影响在饲养30天(30d)后,收集实施例1、对比例2中比格犬的全血,分离出血清,进行蛋白组学测序分析。结果如图2、图3所示。结果显示:与对照组相比,cpp-se组有67个蛋白发生了差异变化(24个下调,43个上调)。
42.针对这67个差异蛋白,我们进行了kegg富集分析,发现这些差异蛋白富集在自然杀伤细胞介导的细胞毒性(naturalkillercellmediatedcytotoxicity)、fcεri信号通路(fcepsilonrisignalingpathway)、b细胞受体信号通路(bcellreceptorsignalingpathway)、肠道免疫网络的iga生产(intestinalimmunenetworkforigaproduction)、nfkb信号通路(nf

kappabsignalingpathway)、fcγ受体(fcγr)

介导的吞噬作用(fcgammar

mediatedphagocytosis)等与免疫相关的信号通路。详细结果如表5所示。
43.表567个差异表达蛋白的kegg富集分析结果
通路id中文通路名p值矫正p值差异蛋白数目map05143非洲锥虫病1.41e-067.06e-0520map05146阿米巴病1.08e-050.0002273619
map05140利什曼病1.44e-050.0002273618map05322系统性红斑狼疮1.82e-050.0002273621map05152肺结核0.0001225320.00095299518map04650自然杀伤细胞介导的细胞毒性0.0002287190.00095299516map04662b细胞受体信号通路0.0002287190.00095299516map04664fcεri信号通路0.0002287190.00095299516map05310哮喘0.0002287190.00095299516map05320自身免疫性甲状腺疾病0.0002287190.00095299516map05330同种异体移植排斥0.0002287190.00095299516map05340原发性免疫缺陷0.0002287190.00095299516map04672肠道免疫网络的iga生产0.0003039720.00108561516map05323类风湿性关节炎0.0003039720.00108561516map04072磷脂酶d信号通路0.0004000940.00117674716map05162麻疹0.0004000940.00117674716map05416病毒性心肌炎0.0004000940.00117674716map04064nfkb信号通路0.0005217670.00130441716map04666fcγ受体(fcγr)介导的吞噬作用0.0005217670.00130441716map05414扩张型心肌病(dcm)0.0005217670.00130441716
实验数据表明,组合喂养了本方案零食配方制备所得零食引起了比格犬体内67种蛋白表达变化(如图1和图2所示),通过对这67种蛋白进行kegg富集分析,发现这些差异表达蛋白主要用于调控免疫通路(具体如表5所示)。在动物免疫系统中,抗体和细胞因子是抵抗病原微生物的重要蛋白。抗体分泌和细胞因子产生之间存在协同作用,这要归因于b细胞受体信号通路和nfkb信号通路的激活。机体各种各样的抗体主要是机体b细胞合成分泌,因此,b细胞受体信号通路的激活是分泌抗体的必要过程。b细胞受体可以受到多种抗原刺激,同时也可受细胞因子的刺激而激活下游通路。nfkb是一种转录因子,负责调节基因的表达。nfkb信号通路是产生细胞因子的关键通路,当外界病原识别细胞膜上受体后,nfkb信号通路被激活并调控多种细胞因子的表达,细胞因子则会进一步刺激b细胞的发育成熟以及抗体的分泌。研究表明,cpp可以刺激淋巴细胞分泌细胞因子il5和il6,il5是淋巴细胞成熟和繁殖的关键因子,而il6则是刺激b细胞转变化抗体分泌细胞的重要因子,因此,在il5和il6协同下,b细胞即可分泌抗体调节机体免疫应答。同时,硒也是免疫细胞中不可或缺的矿物元素,硒可以直接刺激b细胞的繁殖和增强产生抗体的能力,此外,硒也降低免疫细胞的氧化损伤,从而延长免疫细胞的寿命。在动物体内,肠道是最大的免疫器官。肠道的免疫调控是肠上皮细胞分泌抗体来完成的,其中主要为免疫球蛋白a(iga)。在肠黏膜中含有大量的b细胞,在外界细菌等病原刺激下,b细胞可以转化为iga分泌细胞,最终分泌iga来保护肠黏膜,从而阻止有害物质进入血液循环。研究表明,cpp可以刺激动物肠黏膜iga分泌。因此,本研究发现在cpp-se刺激下,比格犬差异表达蛋白和b细胞受体信号通路、nfkb信号通路和肠道免疫网络的iga生成有关,表明cpp-se可以显著提升犬免疫力。因此,本方案中零食配方因添加了cpp-se,即可调控与疾病相关通路的蛋白表达变化,从而显著提升宠物的免疫力。
44.以上所述的仅是本发明的实施例,方案中公知的具体技术方案和/或特性等常识在此未作过多描述。应当指出,对于本领域的技术人员来说,在不脱离本发明技术方案的前
提下,还可以作出若干变形和改进,这些也应该视为本发明的保护范围,这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本技术要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准,说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。

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