细胞代次对病毒敏感性具有影响作用
狂犬病毒的高致死率，使得实验室必须要快速、准确的对其做出诊断。并且一般实验室人员或兽医都需要根据潜在暴露风险评估水平，每6~24个月进行一次抗狂犬病毒中和抗体检测。目前狂犬诊断的金标准还是直接免疫荧光法。另外也有一些其他手段的应用，比如组织培养感染试验（TCIT），病毒分离技术，血清学方法等。这些方法都需要细胞对病毒的敏感性保证，所以健康正常、可连续传代、或无限增殖的细胞基质在狂犬病毒领域的实验室研究中是重要的。
鼠神经母细胞瘤细胞C-1300（NA细胞）由于较好的病毒敏感性，是病毒分离和血清中和试验常用的连续传代细胞系。但是由于各实验室间的标准、习惯不同，细胞管理尚存问题。因为长期的传代接种可能会累积一些选择压力，并且在连续传代后不排除一些特征属性的变异。即便在一些规范中提到需要记录细胞代次等问题，但对代次的要求仍无考量标准。
来自纽约州卫生部狂犬实验室的研究人员，采用组织培养感染试验（TCIT），血清中和试验，RT-PCR和荧光检测等，对NA细胞中代次（43+），高代次（800+）和极高代次（1200+）与狂犬病毒（RV）的特异性和敏感性进行了比较研究。相关论文发表在“Journal of Virological Methods”。
文章显示，RT-PCR的平均Ct值反映中代次(IP，43~108代)、高代次(HP，851~925代)的细胞对病毒感染无差异，极高代次(EHP，1240~1273代)细胞呈现不同，Ct值较高说明敏感性降低，但是差异不具统计学意义（图1）。
图1
通过免疫荧光检测，EHP细胞感染抗原形态差异不大，但在抗体中和试验时显示，高代次细胞的病毒敏感性或产量是偏低的（图2）。
图2
在曾有的一些研究中，比如牛陀螺状细胞与牛病毒性腹泻病毒，随着细胞代次（8~19 vs.83~89）的增加，细胞会有多染色体等形态学变异，但是病毒敏感性尚无明显差异。但也有一些研究报道了HSV-1在比较了各代次（27~48代）的人胚肺成纤维细胞后，发现48代以后病毒感染颗粒明显偏少。代次升高还会导致噬斑减少，所以对于某些质量检测可能有一定影响。
细胞代次对病毒敏感性的不同可能是由于毒素或激素等外部刺激的改变，细胞应答发生改变，在一些譬如线粒体细胞毒或K+介导的去极化过程中，低代次细胞具有更好的缓冲和恢复能力。
本文结论指出，在一些研究中需要定期检测细胞的病毒敏感性，以确保试验的完整性和可重复性。
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