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小鼠脾脏的组织学

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2024-09-16 15:01

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实验小白

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这一期，我们“实验小白”微信公众号继续和您一起学习小鼠脾脏的解剖学知识。

打开腹腔

1. 固定小鼠，分离皮肤

a.固定小鼠：首先用70%-95%的乙醇对小鼠腹部进行消毒；用注射器的针头将小鼠的四肢固定在包有锡箔纸的泡沫板上；

b.分离皮肤：用剪刀从与小鼠耻骨水平的中线处剪一个小口子，然后沿着中线纵向剪开皮肤直到颏，最后用镊子顿性得将皮肤与腹膜壁分开（如上图所示）。

2. 打开腹腔

1.首先用镊子在腹部中央位置将腹部肌肉向上拉起（图中1的位置），然后用剪刀剪出一个小的切口；

2.用剪刀沿着从中线向上将小鼠腹膜剪开，直到小鼠的剑突（图中2的路线）；

3.为了暴露生殖器官、直肠和膀胱，用剪刀沿着图中3和4的线路，向着小鼠骨盆方向剪开小鼠腹膜；

4.为了暴露腹腔中的器官，沿着肋骨将腹部肌肉切开（图中5和6的路线）。

下图是打开的腹腔：

检测腹腔内整体情况

打开腹腔后，在移动任何器官之前，首先要观察腹腔内的器官位置是否有异常、肠道是否有扩张、腹腔中是否有液体、出血以及器官之间是否有粘连。

器官之间有粘连一般提示有炎症存在，如腹膜炎。急性腹膜炎还可导致腹腔内有黄色的浑浊液体存在，而腹腔内如果有澄清的液体存在则提示小鼠有肾衰、心衰或者肝衰等疾病。另外，腹腔内如果有出血，则提示可能有尿道，生殖道等血管出血。

脾脏

1. 脾脏的解剖位置

用镊子拉起胃，就可以看到脾脏（如下图）。

2. 脾脏的形状

小鼠的淋巴组织主要包括脾脏、淋巴结、胸腺和肠相关淋巴组织（GALT），小鼠没有扁桃体。而脾脏是一个常椭圆形状，可以直接用镊子拉扯分离。C57黑鼠常常因为脾脏红髓中存在黑色素而导致脾脏部分成黑色（如下图）。脾脏除了负责过滤血液中衰老的红细胞，其还是机体第二大的免疫器官，主要介导血液来源的抗原引起的免疫反应。

3. 脾脏的组织学

脾脏的组织切片一般是在其最宽的地方取横切面，这样能够得到最稳定的结果，并且可以获得脾脏的所有结构(Morawietz et al. 2004; Elmore 2012)。也有人建议(Suttie 2006)，为了获得足够数量的白髓数量，应该对脾脏进行纵切，但是这种技术在小鼠实验中很难成功。

脾脏分为白髓、边缘区和红髓三部分，脾内无淋巴窦，但有大量的血窦。

白髓（white pulp）主要由淋巴细胞密集的淋巴组织构成，在新鲜脾的切面上呈分散的灰白色小点状，故称白髓。它里面含有动脉周围淋巴鞘(PALS)、边缘区和滤泡区，生发中心（germinal centers）位于PALS内。

边缘区（marginal zone）位于白髓和红髓交界处，该区的淋巴细胞较白髓稀疏，但较脾索密集，并混有少量红细胞。此区含有T细胞及B细胞，并含有较多的巨噬细胞。下图为边缘区的细胞组成：

红髓（red pulp）分布于被膜下、小梁周围及边缘区外侧，因含有大量血细胞，在新鲜脾切面上呈现红色。红髓由脾索及血窦组成。另外，红髓区也包含了大量的巨噬细胞。

参考文献：Mebius RE, Kraal G (2005) Structure and function of the spleen. Nat Rev Immunol 5: 606-616.

下面是脾脏组织HE染色的结果示例：

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