小动物活体成像技术常见问题分析
背景介绍
随着生物医学研究的快速发展，小动物活体成像技术逐渐成为生命科学领域中一项重要的研究工具。
活体成像技术，即在不损伤生物体的情况下，通过高精度的成像手段观察生物体内的生理、病理变化。这一技术的广泛应用不仅极大推动了基础医学研究的进展，还对新药研发、肿瘤治疗、基因研究等多个领域产生了深远的影响。传统的动物模型实验方法存在一定局限性和不足，特别是需要大量的动物分组和在不同时间点解剖获取数据, 得到多个时间点的实验结果，存在工作量大和组间差异问题。
相比之下，活体成像技术通过对同一组实验对象在不同时间点进行成像，跟踪同一观察目标（标记细胞和标记分子）的移动及变化，不存在常见的组间差异，工作量和实验动物消耗可大为减少，所得的数据也更加真实可信。此外, 活体成像技术不涉及放射性物质，具有操作简单，所得结果直观，灵敏度高等特点，可用于追踪靶细胞数量，体积变化和体内分布，从分子和细胞水平对药物疗效进行评估。
常见问题分析（FAQ）
Q
荧光素钠盐和荧光素钾盐有什么区别？
A
二者在使用效果上无明显差异，均溶于水，但荧光素钠盐溶解度(100mg/mL)要高于荧光素钾盐(60mg/mL)。在体内实验研究中，研究者更倾向于选择荧光素钾盐。
Q
为什么溶解荧光素钠盐或者钾盐的时候需用不含Ca2+或Mg2+离子的PBS，有无别的盐溶液可用来溶解荧光素？
A
PBS中的Ca2+、Mg2+抑制某些蛋白酶的活性。此外 Mg2+是催化荧光氧化的重要因素，Ca2+是和腔肠素氧化有关的离子，因此建议使用DPBS,其他的盐溶液也可用来溶解荧光素，但要避免溶液中的阳离对实验造成影响。
Q
描述荧光素酶的发光特性？
A
荧光素腹腔注射老鼠后约1 min后，能够表达荧光素酶的细胞开始发光，10 min后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约20-30 min后开始衰减，约3 h后荧光素排除，发光全部消失，最好的检测时间是在注射后15-35 min内。其动力学曲线如下图：
Q
怎么将荧光素注入小鼠体内，注射方法之间的区别是什么？
A
荧光素可通过腹腔注射或尾部静脉注射注入小鼠体内。约1min可扩散到小鼠全身。大部分情况下使用荧光素浓度为150mg/kg。20g的小鼠约使用3mg的荧光素即可。
对于腹腔注射来讲，扩散较慢，开始发光较慢，持续发光时间较长。
对于荧光素的尾部静脉注射，扩散快，开始发光快，但发光持续时间较短。
Q
荧光素底物可以透过血脑屏障吗？
A
底物荧光素，约280道尔顿，其脂溶性非常好，很容易透过血脑屏障。注射一次荧光素能保持小鼠体内荧光素酶标记的细胞发光30-45 min。每次荧光素酶催化反应只产生一个光子，这是肉眼无法观察到的。
Q
用荧光素进行活体成像与绿色荧光蛋白检测体内发光相比优势何在？
A
荧光素酶的偏红光比绿色荧光蛋白的绿光在体内的穿透性要强近100倍。
荧光素是靠和荧光素酶的相互作用发光，特异性很强，得到的信噪比较高；
荧光蛋白需要激发光来产生反射光，但是在检测的过程中，老鼠的皮毛，皮肤都会产生非特异性荧光，使得信噪比降低。荧光蛋白检测更适合于体外检测，荧光素酶的检测更适合于体内检测。
吉满产品
基于13年的慢病毒包装经验，吉满生物可提供高滴度，多重标记载体的Lucifrese慢病毒现货。除此以外，也可以按照您的实验需求用Lucifrese慢病毒标记特定的目的细胞构建Luc稳定表达细胞系用于肿瘤实验研究。相关产品清单如下：
产品详情可复制链接查看：www.genomeditech.com/product?id=316
案例展示
案例一：YAP-Activated SATB2 Is a Coactivator of NRF2 That Amplifies Antioxidative Capacity and Promotes Tumor Progression in Renal Cell Carcinoma
发表期刊：Cancer Research
影响因子：12.5001
发表单位：浙江中医药大学附属第一医院
吉满助力（原文引用）
“Transduction with the CMV-Luc-PGK-puro lentivirus（Genomeditech）facilitated the detection of tumor growth in the lung by intravital imaging.”
图片来源于doi:10.1158/0008-5472.CAN-22-1693F：使用亲本或 SATB2 缺陷型 786-O 细胞进行原位肾移植后，小鼠从第 7 天至第 56 天分别用或不用 5-FU 处理的代表性 BIL 图；
右图，肾脏中 BIL 信号的量化
案例二：JP3, an antiangiogenic peptide, inhibits growth and metastasis of gastric cancer through TRIM25/SP1/MMP2 axis
发表期刊：Journal of Experimental & Clinical Cancer Research
影响因子：11.3997
发表单位：南京医科大学
吉满助力（原文引用）
“CMV-Luc-Puro lentiviral vectors (Genomeditech, Shanghai, China) were transfected into B16F0 and B16F10 cells and used for the bioluminescence assay.”
图片来源于doi:10.1186/s13046-020-01617-8H：利用IVIS体内图像系统检测小鼠体内的荧光素酶信号并拍照
案例三：Glycine Decarboxylase (GLDC) Plays a Crucial Role in Regulating Energy Metabolism, Invasion, Metastasis and Immune Escape for Prostate Cancer
发表期刊：International Journal of Biological Sciences
影响因子：8.1996
发表单位：南方医科大学
吉满助力（原文引用）
“22RV1 cells were cotransfected with luciferase lentivirus (Genomeditech, Shanghai, China)”
图片来源于doi: 10.7150/ijbs.85893I：p-GLDC组、p-MT-GLDC组、p-NC组小鼠原位移植瘤图像
J：p-GLDC组、p-MT-GLDC组、p-NC组肿瘤体积
K：记录每只小鼠肺、肝、肾、胰腺、睾丸、前列腺等转移灶的荧光素酶表达强度
L：肿瘤转移的器官分布频率
扫码咨询快速响应
吉满生物科技（上海）有限公司成立于2011年，是专业从事生物科技前沿技术研发的高新技术企业。
以病毒包装为基础，密切关注行业最前沿的科研进展，十二年深耕细作，创建了具有自主知识产权的分子生物学、细胞生物学、病毒包装、细胞株构建、报告基因、抗体表达、蛋白表达、IVD等技术平台。
2020年成立了专业细胞系子品牌DDXCELL，提供报告基因检测、病毒包装、工程细胞株构建，基因编辑及药物筛选评价等技术服务及相关产品。2022年载体品牌“载体通·Genovector”焕新升级，同时推出全新试剂品牌“优试剂·Genoagent”，贯穿科研始末。
吉满可为客户提供几千种的现货载体和一站式定制服务。
相关知识
小动物活体成像技术常见问题分析
干货！小动物磁共振成像研究技术
小动物活体成像系统（MRI）
小动物磁共振成像（MRI）系统
小动物 PET/CT 成像服务外包
动物实验：小鼠活体成像：探索生命奥秘的窗口
小动物磁共振成像的原理以及在科研中的应用
小动物 PET/MRI ,小动物PET成像系统
小动物行为学视频采集与分析系统检测方案
小动物超声成像系统
网址: 小动物活体成像技术常见问题分析 https://m.mcbbbk.com/newsview262644.html
| 上一篇: 小动物影像技术 |
下一篇: 【犬猫X线判读·图文】第⑦期：一 |
