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相信很多人都养过宠物，也一直有一句话这么说，宠物是人类忠实、可靠的朋友，它们的陪伴，是长情和治愈的；而它们的健康，需要我们的照料和呵护。作为宠物健康的关键因素，确保它们从食物中获得适量的维生素对它们的成长至关重要。本期，我们就一起研究下宠物食品中的那些营养物质。
LC-MS-MS
通过使用 LC-MS-MS分析宠物食品中的Vitamin维生素D2 /D3和PreVitaminD2 /D3 (前维生素，中间体) 。和人类膳食补剂中的情况一样，在确定宠物食品中的这些维生素时，也存在着相同的挑战，例如基质干扰、异构体转化和光敏感性等问题。
维生素D是一种必需的脂溶性维生素，在动物骨骼形成和其他多种有益功能中都是非常需要的。维生素D3通常是在阳光下自然产生的。如果没有充分的光照，它也可以通过在饮食中补充。
在动物体内，维生素D3通常更具生物活性，需要与维生素D2区分开来，维生素D2来源于一些植物和蘑菇。相同的，前维生素D2和前维生素D3，在不破坏其自然平衡的情况下准确测量它们也很重要，用于准确评估它们的来源。
定量测试复杂宠物食品基质中的维生素D面临着一系列挑战，从异构体转化到光敏性、皂化和萃取效率等。
使用棕色样品瓶在昏暗的灯光(避光的环境)下对样品进行分析，实验大约不到1小时即可完成。在室温下皂化以最大限度地减少向前维生素D形式的转化，以获得更准确的定量结果。2次液-液萃取后，正相SPE使用Strata®的NH2小柱进一步去除一些基质本底成分。
基于五氟苯基固定相的极性和芳香选择性，采用的是Kinetex® 2.6 µm F5进行快速分析，维生素D和前维生素D的分离度接近基线。为了重现性考虑，使用 100% 有机溶剂将 LC 梯度再延长两分钟，以洗脱一些可能会干扰后续进样的基质成分。
用空白样品做对照，采用标准加入法做定量测试。评估了准确度和精密度两个QC指标。维生素D2 /D3本体化合物的准确度为 99.2-106%，CV % 为 3.23-8.61%，维生素D2 /D3前体化合物的准确度为 89.8-110%，CV % 为 2.32-9.01% 。
该应用展示了一种分析狗粮中维生素D2和前维生素D2和D3的定量方法，展示了在各种食品和宠物食品基质中更多可能的探索机会。
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