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如何进行小鼠的体力抗疲劳研究测试【1】

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2024-10-09 12:02

大小鼠转棒疲劳仪，是做运动障碍模型、运动疲劳模型等常用的一种设备仪器。

疲劳症状现状：随着工作和生活压力越来越大，人们经常感到疲劳。疲劳是指长时间或高强度的体力或脑力劳动后，机体无法维持特定水平的生理机能或预定强度的运动。根据现代医学，疲劳可分为精神疲劳、身体疲劳、病理性疲劳和心理疲劳。其中，身体疲劳可引起各种生物调节和各种系统运行障碍，一般表现为情绪低落、精神萎靡、记忆力减退、动作迟缓、全身无力、腰膝酸软、肌肉酸痛等症状。严重时会引起慢性疲劳综合征。据统计，疲劳的发生率约为7%~45%，已成为困扰现代人身心健康的关键问题。许多因素可导致身体疲劳，主要机制可归纳为三大类，即能量耗竭、代谢产物积累和氧化应激失衡。

现阶段抗疲劳：目前市面上常见的抗疲劳产品，一般都是通过添加咖啡因等成分来发挥作用，有些产品已经超过了人体的安全限度。咖啡因只能刺激中枢神经系统产生短期兴奋。长期服用会导致耐受，过量摄入还可能导致心血管疾病。研究表明，某些药食同源物质的摄入可以促进糖原的合成，缓解机体的氧化应激反应，加速代谢产物的排除，从而显示出缓解体力疲劳的潜力。

根据2003版《保健食品检验与评价技术规范》的要求，本研究针对由人参、枸杞、黄精、葛根与烟酸等物质复配而成的人参葛根植物饮料，进行缓解体力疲劳的效果评价，为人参葛根植物饮料的应用和推广提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料与试剂

人参葛根植物饮料；咖啡因标准品（标准值：99.8%）；乳酸测定试剂盒（bloodlacticacid，BLA）、糖原测定试剂盒、血尿素氮测定试剂盒（bloodureanitrogen，BUN）；乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase，LDH）ELISA试剂盒、肌酸激酶（creatinekinase，CK）ELISA试剂盒。

1.2仪器与设备

大小鼠抓力测定仪；疲劳转棒仪；罗氏血糖仪（ACCU-Chek）；多功能酶标仪（BioTekInstruments）。

1.3试验动物

5周龄雄性SPF级ICR小鼠。

1.4试验方法

1.4.1动物试验设计

60只5周龄的ICR雄性小鼠，经过7d的适应期后，按每组10只随机分为6组，具体分组见表1。小鼠的饲养环境为温度(23.1±0.9)℃、相对湿度52.8%±3.0%、换气次数为10~20次/h、光照12h和黑夜12h清洁干燥条件下，并能够自由饮食、饮水。试验方案经江南大学实验动物中心伦理委员会审查批准。如表1所示，小鼠随机分成6组，依次是灌胃无菌生理盐水的空白组、灌胃无菌生理盐水的试验对照游泳组、灌胃咖啡因的咖啡因组、以及分别灌胃低、中、高剂量组人参葛根植物饮料的3组，根据分组情况和灌胃物质要求，各组小鼠连续30d灌胃0.02mL/g·bw的灌胃物质进行干预试验。且在第30d时，除空白组外，其余各组均建立负重游泳运动性疲劳模型。

1.4.2小鼠转棒持续时间的测定

小鼠转棒试验参考王艺博等的方法，在第27d和第28d灌胃结束30min后进行转棒试验，前一天为转棒训练，记录后一天正式试验中各组小鼠的转棒持续时间以评估小鼠的运动平衡性。

大小鼠转棒疲劳仪，XR-6D/XR-6C，上海欣软

1.4.3小鼠抓力的测定

小鼠抓力试验参考HSU等的方法，在第28d灌胃结束30min后，测定并记录小鼠的前肢抓力用于考察小鼠的肌肉力量。

大小鼠抓力测定仪，XR501，上海欣软

1.4.4小鼠负重游泳模型的建立

第30d，灌胃结束30min后，参考《保健食品检验与评价技术规范》中缓解体力疲劳功能评价方法，针对游泳组、咖啡因组、低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠建立负重游泳运动性疲劳模型。

1.4.5小鼠疲劳相关指标的测定

造模结束后，取眼球血处理后得血清。参照相应试剂盒说明书测定血清中尿素氮、乳酸、血糖、肝糖原、肌糖原、乳酸脱氢酶、肌酸激酶的含量。

1.5数据分析

数据结果以“平均数±标准差”表示，以GraphPadPrism7.0进行数据统计分析和绘图。数据统计采用单因素方差分析和Dunnett-t检验进行显著性差异分析，P<0.05表示显著性差异具有统计学意义。