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狗血型介绍及检测

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2024-10-15 02:01

狗血型介绍及检测

百卫生物科技陈靖寰博士

前言

狗的血型和人类的血型一样，是由红血球表面的抗原所决定，狗红血球表面的抗原大多由糖蛋白构成；由于狗的红血球抗原种类繁多，所以血型的分类也比较复杂。了解狗血型的分类与检测原理，将有助于在临床上处理犬只输血或是繁殖的问题。

狗血型分类

狗血型的分类研究最早从 1910 年开始 (Von Dungren et al., 1910)，经由医疗意外或是动物实验的错配型输血 (mismatched transfusion)，科学家发现超过20种不同的血型，但当时并未用实验方法验证这些血型是否在血清学上属于完全不同的血型 (Swisher et al., 1961, Symons et al., 1992)。之后，由于正常的狗并不带有异体抗体 (alloantibodies)，许多研究团队便透过在不同血型的狗之间的输血来产生抗体，有了这些针对不同狗血型的抗体，便可以用来确认狗的血型。

目前发现狗的红血球抗原超过 13 种，经国际标准认证的为 7 种，但只有其中五种有测定血型的血清，DEA 6 和 DEA 8 已经没有测定血型的血清。一开始狗的血型是依照英文字母分类 (Young et al., 1952)，现行使用 DEA 作为 Dog Erythrocyte Antigen 的缩写，后面再加上数字编号，分别为 DEA 1、DEA 3、DEA 4 、DEA 5 、DEA 6 、DEA 7 、DEA 8。所有的血型都由位于体染色体上的单一显性基因所调控，除了 DEA 1 和 DEA 7 是由多个等位基因 (alleles) 调控以外 (见表一)。之后陆陆续续也发现其他血型，最常见的是在大麦町 (Dalmatians) 发现的 Dal 血型 (Blais et al., 2007)，在北美 85- 100% 的大麦町与 43- 78% 的杜宾 (Doberman Pinscher) 皆带有 Dal 抗原 (Goulet et al., 2017)。

此外，有研究测定出某几种血型中，红血球表面抗原的分子量 (Corato et al. 1997)。虽然仍不清楚狗红血球表面抗原的化学结构，但已确定狗红血球表面抗原属于神经鞘脂质类 (sphingoglycolipids)，与猫红血球表面的抗原相似，带有唾液酸 (sialic acid) 官能基。日本的研究团队发现，根据所含的神经鞘脂质，可将狗的血型分为两类，第一类是带有N-乙酰神经胺酸 (N-acetylneuraminic acid，Neu5Ac) 的血型，第二类则是同时带有 N-乙酰神经胺酸和 N-羟基乙酰神经胺酸 (N-glycolylneuraminic acid，Neu5Gc) (Yasue et al., 1978)。尽管有不少针对狗红血球表面抗原的研究，目前还是未能在分子或蛋白质的层次定义狗的血型 (Giger, 2014)。

狗血型对输血的影响

狗血型的表面抗原里，DEA 1.1、DEA 1.2 和 DEA 7 抗原具有较强的免疫原性，在输血时需特别注意。DEA 1 血型有四种亚型，DEA 1.1、DEA 1.2、DEA 1.3和 DEA 1-，遗传上的显隐性为 1.1 > 1.2 > 1.3 > 1-；DEA 1.3 目前只在澳洲的德国牧羊犬 (German Shepherd) 检测出 (Symons et al., 1991)。相对地，DEA 1.1 与 DEA 1.2 是最重要的两个狗红血球表面抗原，大约有 60% 的狗带有 DEA 1.1 或是 DEA 1.2 的抗原。DEA 1.1 和 DEA 1.2 的抗原/ 抗体反应是导致急性输血性溶血的主要因素。当输血狗的血型为 DEA 1.1 阳性或 DEA 1.2 阳性，而被输血狗为 DEA 1- 时，首次输血由于狗天生不带有异体抗体，因此不会出现严重的溶血反应，但几天之后被输血狗就会产生相对应的抗体。若是再次输入 DEA 1.1 阳性或 DEA 1.2 陽性的血液，被输血狗血液的 DEA 1.1 或 DEA 1.2 抗体与输入血液的 DEA 1.1 或 DEA 1.2 抗原结合，从而产生严重的急性免疫溶血反应，导致动物病情加重或死亡。理想状况下，应该只用 DEA 1- 的狗作为输血狗，若使用 DEA 1.1 阳性或 DEA 1.2 阳性的狗输血，也只能输给 DEA 1.1 阳性或 DEA 1.2 阳性的狗 (如图一所示)。

相较于 DEA 1.1 和 DEA 1.2 抗原，DEA 7 抗原是较弱的免疫溶血因子，其抗原/抗体反应主要会导致输血后红血球寿命缩短，会在 3-5天内崩解死亡。此外 DEA 7 抗原分子的稳定性较差，升高温度就可以破坏其免疫原性。除了 DEA 1.1、DEA 1.2及DEA 7 之外，其它表面抗原的免疫原性都很弱，DEA 3和DEA 5的抗原/抗体反应与 DEA 7 类似，輸血後会导致红血球寿命缩短；DEA 4的抗原/抗体反应对输血的红血球没有任何影响。
鉴于狗血型的复杂多样以及 DEA 1.1 和 DEA 1.2 抗原在输血时的重要性，临床上通常将狗血型分为 DEA 1.1、DEA 1.2 及 DEA 1- 三大类。每大类血型都可与其他的 DEA 血型任意组合，因此，这三大类血型其实都是多种 DEA 的组合。举例来说，一只狗的血型可以是 DEA 1.1, DEA 3, DEA 8 或是 DEA 1-, DEA 4 的复合血型。此外，由于后者只带有 DEA 4 抗原，没有其它血型的抗原，很适合作为输血狗。在众多品种的狗里，格雷伊猎狗 (Greyhound) 大多是 DEA1-，再加上牠们的红血球含量比起其他品种高许多，综合上述两种优势，兽医血液服务机构常选用格雷伊猎狗作为输血狗。

总而言之，DEA 1.1 和 DEA 1.2 抗原是狗输血时主要的溶血因子，其它的血型一般不会影响到不同个体之间血液的兼容性。

狗的血型对狗繁殖的影响

在狗的繁殖过程中，种狗的血型是很重要的决定因素之一。之前有报导指出，血型为 DEA 1- 的母黄金猎犬与 DEA 1.1 的公狗交配，第一胎的七只 DEA 1.1 幼犬全部健康存活；但是与同一只公狗交配生下的第二胎幼犬，全部在哺乳三天后死亡。调查后发现，该雌狗在第一次生产时，有部分幼犬的脐血透过破裂的子宫内膜进入母体，刺激母体产生抗 DEA 1.1 的抗体。而当雌狗第二次生产后开始哺乳幼犬时，母乳中的 DEA 1.1 抗体导致幼犬的溶血性贫血。因此，如果让不同血型的狗交配，极有可能造成新生幼犬的死亡。

另一个导致新生幼犬溶血性贫血的原因是，DEA 1- 的雌狗在交配前，曾接受过 DEA 1.1 或 DEA 1.2 血型的输血。同样地，雌狗体内也会产生抗 DEA 1.1 或 DEA 1.2 的抗体，当 DEA 1.1 的幼犬诞生后，这些抗体随着母乳被幼犬吸收，进而导致新生幼犬溶血性貧血。因此，在狗的育种过程里，应特别注意进行交配的种狗血型。

狗血型检测试剂

由于 DEA 1.1和DEA 1.2 抗原是主要溶血因子，因此市面上的狗血型检测产品多针对 DEA 1.1和DEA 1.2 抗原来设计。产品内含有针对 DEA 1.1 或 DEA 1.2 的抗体，当抗体与待测血液样本的抗原结合时，会产生凝集反应，因此可判别为阳性；反之， DEA 1- 的血液无法与抗体结合，因此不会产生凝集反应。

結語

狗血型的检测在狗的输血治疗与繁殖过程里都极为重要，若能加速普及狗血型检测，建立全国的狗血型数据库，对于狗的健康与生育都会更有保障。

表一狗血型分类

原始命名抗原名称抗原大小 (kD) 天然抗体现行命名族群比例输血反应 CEA 1 A1 50 和 200 无 DEA 1.1 42% 急性输血性溶血 CEA 2 A2 85 无 DEA 1.2 20% 急性输血性溶血无 DEA 1.3 未知 CEA 3 B 34-71 有 DEA 3 6% 弱溶血反应，红血球寿命缩短 CEA 4 C 32-40 无 DEA 4 98% 无 CEA 5 D 未知有 DEA 5 23% 弱溶血反应，红血球寿命缩短 CEA 6 F 未知无 DEA 6 98% 弱溶血反应，红血球寿命缩短 CEA 7 Tr 53, 58 和 63 有 DEA 7 45% 弱溶血反应，红血球寿命缩短 CEA 8 He 未知无 DEA 8 40% 弱溶血反应，红血球寿命缩短

图一输血时的狗血型配对

Reference:

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