<猫血型介绍及检测> (二)
猫血型检测试剂
在生物科技突飞猛进的现代,检测血型的方法包含生物化学的层析法 (Chromatography)和凝集试验 (Agglutination assay),以及分子生物方面的DNA定序分析等。目前血清学上较常用血型鉴定方法包含,免疫层析法 (Immunochromatography)和凝集试验两种,以下将进一步介绍已知猫血型检测方法与应用上之差异。
首先,在生物化学的层析法中,是一种分离混合物的技术,已应用于猫血型检测的有薄层层析与免疫层析法。薄层层析法,其原理是利用混合物在固定相与流动相之间的移动速率不同,以达分离混合物的方法;另外在免疫层析法,其原理是利用毛细现象将抗原或抗体带至特定区域,此时抗原和抗体两者之间行专一性与亲和力之作用,以达检测之目的。举例来说,先前文献指出,利用薄层层析法搭配标准品使用,藉由红血球表面抗原于层析膜上泳动速率不同,可以鉴别出AB血型系统的表面抗原种类,如NeuGc和NeuAc,进而区分出猫的血型(Griot-Wenk et al., 1993)。或是使用免疫层析法,将利用anti-NeuGc和anti-NeuAc抗体来辨认认A与B血型(Seth et al., 2011)。
此外,在生物化学的凝集试验亦常应用于血型检测,其原理亦是藉由免疫反应,抗原和抗体相互作用结合所出现的凝集现象。于猫血型检测中,最常使用便是来自小麦 (Triticum vulgaris)的lectin,此lectin会与B型猫红血球产生明显凝集反应,而A型猫红血球则无凝集现象(Butler, 1991)。
在DNA定序法方面,以目前最为广泛使用的Sanger DNA定序法,其原理是使用双脱氧核糖核苷酸,加入正在合成的DNA中来随机终止DNA合成的过程,进一步分析终止产物片段,进而得知DNA片段序列。已有文献指出,相对于A型猫而言,B型猫体中CMAH基因外显子(exon1)多出18个硷基对,进而导致CMAH蛋白质无完整功能。故藉由分析CMAH基因可以得知AB血型系统,包含难以取得检体的胎儿,皆可藉由收集母体羊水来测定胎儿血型。
目前市面上的猫血型快速检验试剂,有的产品使用免疫层析法来区分AB血型系统,也有产品是使用单株抗体和lectin来分别辨识A型和B型血。
结语
由于宠物市场商机蓬勃,猫已是家中不可或缺伴侣之一,对于牠们的医疗照护日趋完整,目前对于猫AB血型系统研究已有一定程度了解,除mik血型系统外。故可利用血清学检查(包含交叉试验)和DNA血型基因鉴定,以解决临床实务上的问题,提供宠物猫最高质量之照护。