犬肌肉萎缩症
百卫动物临床检验实验室 王建能 博士
犬肌肉萎缩症 (Muscular Dystrophy)
简介
犬肌肉萎缩症(Muscular Dystrophy)，是一种性联隐性遗传疾病，可见于哺乳动物，其中最常见的类型是杜显氏/贝克氏肌肉萎缩症(Duchenne/Becker Muscular Dystrophy, DMD)，DMD可发生在人及犬身上，该疾病在幼儿是死亡率最高的遗传性疾病，在狗狗身上主要好发于黄金猎犬，通常在幼犬时就会开始发病，约在4周龄开始有症状并且发展相当迅速的且有越发严重的迹象，犬与人类的DMD病因类似且临床症状是相同的，患病犬会因横纹肌肌肉萎缩，逐渐的变得虚弱，四肢慢慢失去活动力，甚至造成咀嚼及吞咽困难，最终影响呼吸及心脏肌肉进而导致死亡。DMD是因为体内一个称为dystrophin的基因缺陷有关，dystrophin在维持肌肉收缩时维持肌肉结构中相当重要，该基因的突变会破坏dystrophin蛋白产生，在骨骼肌中缺乏该蛋白会导致肌肉细胞的degeneration及死亡，进而影响肌肉组织有萎缩及纤维化的现象或是丧失呼吸功能，临床迹象上最刚开始会发现小狗有肌肉坏死现象。此基因可利用polymerase chain reaction(PCR)，增幅放大该突变基因片段并送定序等方式诊断出，家中若有新生幼犬在早期无法确定家中宠物是否具有该疾病，我们可细心观察家中狗狗是否具有些许临床症状，以及是否有不同以往的行为，安排至门诊检查身体检查，并安排至兽医院门诊检查，若想知道狗狗是否罹患DMD，可进一步藉由神经学检查、全血细胞技术分析、X光分析、各项生化特征检验分析以及基因检测及早发现并陪伴及照护家中爱犬。
犬肌肉萎缩症 (Muscular Dystrophy)
犬肌肉萎缩症((Muscular Dystrophy) 是一种X染色体性联隐性遗传疾病，是犬类三十种遗传疾病中的其中一种，此遗传疾病与运动相关的肌肉衰竭有关，该骨骼肌疾病特征是肌肉僵硬和肌肉无力，进而导致肌肉功能的丧失。其中最常见的类型是杜显氏/贝克氏肌肉萎缩症(Duchenne/Becker Muscular Dystrophy, DMD)，主要发生在黄金猎犬身上(Golden Retriever)，如下图一所示，Dystrophin是位于肌肉上的一个大型结构蛋白，会结合在其他的结构蛋白(structure protein)上面，对于维持肌肉细胞膜结构上相当重要，若dystrophin蛋白的缺少或异常，会使得肌肉在收缩的时候便无法维持细胞膜的完整。
图一、Dystrophin 功能及结构。(https://www.everydayhealth.com/genetic-diseases/what-causes-duchenne-muscular-dystrophy/)
杜显氏肌肉萎缩症其发病原因为X染色体短臂Xp21.3处的dystrophin基因发生了异常缺陷，使得该基因发生了点突变或是丢失了一段名为DMD的基因，导致基因无法调控并制造出完整功能的dystrophin蛋白，然而dystrophin蛋白是肌纤维膜(Sacrolemma)上相当重要的蛋白，缺少了dystrophin会使得整个肌纤维膜变得脆弱无力、长时间的肌纤维伸展后，最终造成肌纤维膜的撕裂，肌肉细胞就容易受损死亡，进而导致整个肌肉组织量变少及萎缩。缺乏这种蛋白的患犬因骨骼肌肉细胞会萎缩及死亡，因此血液中会释放大量的creatinine phosphokinase(CPK)，犬血清中若CK活性>20,000 IU/L则有可能罹患该疾病。
杜显氏肌肉萎缩症(DMD)是一种遗传疾病，也是肌肉萎缩症中常见的一种，通常发生在雄犬身上、因每一条X染色体上就有一个DMD基因，所以雌犬中的每个细胞中都有两个DMD基因，而雄犬身上只有一个DMD基因，由于DMD是X染色体性联遗传隐性疾病，所以若雌犬身上有一个缺陷的X染色体(异常的DMD基因)则通常不会发病，为隐性带因者，但若是雄犬，只要其自带因者的母亲遗传到有缺陷的X染色体(异常的DMD基因)就一定会致病(如下图二)。
图二、性染色体隐性遗传(X-linked Recessive)。
DMD临床症状及诊断
DMD在幼犬身上最初的症状象是步态僵硬或是后肢(腿)出现笨拙笨拙的跳(bunny hops)，与正常的幼犬相比较下可以发现，患病犬的敏捷性及活动性或出现下降，且通常出现肌肉萎缩或肌肉质量下降。肌肉萎缩会使狗狗的脊椎、肋骨和颅骨骨骼比正常狗明显的突出。DMD也会连带影响进食和吞咽时所使用到的肌肉，狗狗可能会因食道功能减弱或丧失，引发巨食道症(Megaesophagus)导致食物和液体在食道中堆积和滞留或是食物被呕吐出来。另外、罹患DMD的狗狗也会出现异常大的舌头，这会导致牠们很难进食、饮水造成容易流口水。
以下列举了几项患病犬其临床症状：
肌肉僵硬、步态僵硬、肌力衰弱、肌肉量减少、肢体畸形。
渐进式全身性肌无力、抵抗运动、活动力下降、颤抖、共济失调。
舌头肿大、肌肉肿大、巨食道症。
摄食或咀嚼困难、吞咽困难、偶吐或反流、呕吐。
呼吸速率增加、呼吸过度、张嘴呼吸、喘气、呼吸困难。
DMD 目前主要诊断方式为活体组织病理诊断以及组织免疫荧光染色，这两种方式可以帮助兽医师们区分不同类型的肌肉萎缩症。另外、有许多疾病都会对造成犬四肢协调能力的丧失或衰弱等相似病症。因此要确认狗狗是否患有DMD，还须利用各种测试来确认是否罹患DM是相当重要且必须的。也可利用X光检测、肌电图检查(Electromyography, EMG)，血清肌酸激酶浓度高低来检验。若是家中狗狗好像疑似发病初期，都可藉由品种、神经学检查、全血细胞技术、生化指标液分析、X光分析、心电图(EKG)以及DMD基因检测，在临床诊断上我们可藉由专业兽医师进行更精准的检测详细了解狗狗出生后的临床症状，来避免误诊。
犬DMD治疗
目前尚无专门针对DMD的治疗方法，不过药物治疗可能有助于缓解症状。但糖皮质类固醇可能减缓疾病的进展，但也会伴随着类固醇药物副作用，也可进行肢体畸形或步态异常的手术，住家环境中的支持疗法也可能具有帮助，但大多数情况下，此疾病是致命的且随着肌肉的退化，狗狗获得营养的难度增加，心脏功能也会随之下降。
虽然此疾病没有药物可以根治但好消息是，意大利米兰圣拉斐尔科学院干细胞研究所所长Cossu教授于Nature期刊发表了这项研究报告，该研究团队从健康狗狗（异体细胞移植）或是患病犬（自体经病毒蛋白基因修正的细胞移植）的肌肉血管分离出mesoangioblast，藉由体外培养足够量细胞后直接或经由病毒载体（表现human microdystrophin基因）来修正肌缩蛋白(dystrophin)，经由动脉注射到患病犬身上。这些干细胞进入狗狗血管后，在狗狗体内被带到患部肌肉，结果这些肌肉获得改善肌肉力量变强，从而改善病狗行走能力。另外一个克萨斯大学达拉斯西南医学中心（UT Southwestern Medical Center）分子生物学教授兼系主任艾瑞克・欧尔森研究团队最近在《科学杂志》（Science）发表的一篇文章指出也利用了目前最新技术，基因编辑技术，一种特别的基因组CRISPR（clustered regularly interspaced short palindromic repeat），利用CRISPR剪接突变的dystrophin蛋白基因，修正致病序列，并成功修正了四只小猎犬的基因缺陷，并且让患病犬可以过正常生活。虽然目前这些干细胞疗法及基因疗法尚未被批准临床使用，但也给了该疾病一片曙光。
结语
DMD 一般来说是不治之症，在临床上确诊后无疑是将狗狗与安乐死化上等号，对于主人来说得知确诊DMD是个绝望且残酷的讯息。但这并不能代表我们就什么都没办法做，我们可以提供更多的居家照护，陪伴家中狗狗给于他们更好的居家环境，且在干细胞疗法及基因疗法越趋成熟，相信在未来可以提供更多DMD的治疗方式，另外，也要避免购买宠物犬及繁殖患病犬。若家中猫狗年纪若已经超过7岁，通常每年至少要带它们做一次全身检查，包括抽血、确认体内各项生化指数、血糖含量、胸部X光。适时给予均衡饮食与药物治疗，方可达到早期发现早期治疗的目的。另外、固定同一位兽医师看诊，可建立家中毛孩详细的医疗记录，方便后期随时咨询。
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