猪细小病毒病
猪细小病毒病(英文简称PPI)是由猪细小病毒引起的母猪繁殖障碍性疾病,主要发生于初产母猪,其特征为流产,产死胎、木乃伊胎及病弱仔猪,但母猪通常不表现其他临床症状。近年来发现,猪细小病毒与猪圆环病毒2型混合感染后,可促进圆环病毒病症状的出现。本病呈世界性分布。
【流行病学】
1.传染源 感染本病毒的公猪和母猪是本病主要的传染源;公猪精液可携带病毒,此病毒可来自体内和体外污染。母猪所产死胎、木乃伊胎、弱仔及子宫分泌物中均含有高滴度的细小病毒。由于病毒对外界的抵抗力强,污染的圈舍在4个月内还具有感染性。
2.传播途径 主要为胎盘感染、精液传播(交配感染)。另外,感染猪排毒时间为2周左右,易感猪接触感染猪或被细小病毒污染的物体后,可经口鼻途径感染。
3.易感动物 不同年龄、性别、品种的猪都可以感染,呈地方流行或散发。
本病的发生没有明显的季节性。
【症状及病理变化】本病的主要临床症状是母猪的繁殖障碍。不同孕期感染时,对胎儿的影响有所不同。在怀孕后30d内感染时表现为胎儿死亡,死亡的胚胎被母体迅速吸收,母猪有可能重新发情;在怀孕后30〜50d感染,主要产木乃伊胎;在怀孕后50〜60d感染主要产死胎;怀孕后70d感染时出现流产;怀孕70d之后感染,母猪多能正常产仔,但仔猪带毒。本病还可引起母猪发情不正常和久配不孕等症状。
眼观病变:可见母猪子宫内膜有轻度的炎症反应,胎盘部分钙化,胎儿在子宫内被溶解吸收。组织学检查可见母猪子宫上皮组织和固有层有局灶性或弥散性单核细胞浸润,在大脑、脊髓有浆细胞和淋巴细胞形成的血管套。
感染的胎儿表现出不同程度的发育障碍和生长不良,出现木乃伊胎、畸形、骨质溶解的腐败黑化胎儿。胎儿皮肤充血、出血、水肿和脱水等,全身组织器官可见广泛的细胞坏死、炎症。
【诊断】根据临床症状和流行病学可作出初步诊断。初次妊娠母猪发生流产、产死胎、木乃伊胎、胎儿发育异常等现象,而无其他临床症状,有证据表明是传染性疾病时,则应考虑本病的可能,但确诊必须进行实验室诊断。
1.病原学诊断
(1)病毒分离鉴定 采取流产或死产胎儿的新鲜脏器(如脑、肾、肝、肺、睾丸、胎盘及肠系膜淋巴结等),研磨冻融后,取上清同步接种PK-15细胞和IBRS-2细胞,逐日观察细胞病变。进一步用免疫荧光试验、血凝试验和PCR等方法进行确认。在上述样本中,以肠系膜淋巴结和肝脏的分离率最高;但是如果胎儿死亡时间过长,组织中病毒的感染性逐渐丧失,影响分离结果。本法优点是结果准确可靠,可作为确诊。
(2)红细胞凝集试验(HA) 将含毒组织或分离的病毒在稀释液中研磨,离心后取上清液,利用豚鼠红细胞进行血凝试验,再用已知的细小病毒阳性血清作血凝抑制试验,进一步确认。本法操作简便易行,能进行快速、大量检测,但是其灵敏度低。
(3)免疫荧光技术(IFA) 本方法可以对感染细胞和疑似病例组织中的细小病毒进行快速检测。感染细胞经丙酮固定,待检组织需制成冰冻切片。随后,用阳性血清和荧光素标记的二抗依次染色,最后在荧光显微镜下观察。出现荧光,表明细胞或组织中含有病毒。
⑷PCR技术 针对细小病毒VP2基因设计引物,进行PCR检测,是目前大多数实验室采用的方法,用于分离病毒的鉴定和病料中细小病毒的检测,具有快速和敏感的优点。
2.抗体检测 血凝抑制试验、血清中和试验、酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、琼脂扩散试验和补体结合试验等都可用于检测抗体。其中最常用的是血凝抑制试验。可采取母猪血清,也可用70日龄以上感染胎儿的心血或组织浸出液。被检血清先经56℃ 30min灭活,加入50%豚鼠红细胞(最终浓度)和等量的高岭土,摇匀后放室温15min,经2000r/min离心l0min,取上清液,以除掉血清中的非特异性凝集素和抑制因素。抗原用4个血凝单位的细小病毒,红细胞用0.5%豚鼠红细胞悬液。判定标准暂定1:16以上为阳性。
由于本病毒广泛存在,感染率较高,因此检测成年猪及种猪的细小病毒抗体,仅作为感染的依据,没有临床诊断意义。对仔猪在吃初乳前采血检测,如果抗体阳性,可以判定为生后感染细小病毒,因为感染母猪产生的抗体不能经过胎盘传递给胎儿。
引起母猪繁殖障碍的原因很多,应区分猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪瘟、衣原体、弓形虫和猪布鲁氏菌病等。
【防控】本病无有效的治疗方法。防控原则是不引进带毒猪,以免疫预防为主,初产母猪配种前需获得免疫力。
1.加强饲养管理和消毒措施 坚持自繁自养的原则。如需引种,应从未发生过本病的猪场引进,隔离饲养半个月后,经两次血清学检测,HI效价在1: 256以下或阴性时方可混群饲养。经确诊为细小病毒感染后同窝的幸存猪不能作为种用;母猪流产时,应做好猪场(尤其是繁殖猪舍)的消毒。
2.免疫预防 由于PPV血清型单一及其较强的免疫原性,免疫接种已成为预防本病的最有效措施。初胎母猪在配种前2个月用灭活疫苗免疫一次(必要时可在1个月后加强免疫可获得坚强的保护。我国部分地区使用弱毒疫苗,也取得满意的效果。
此外,以伪狂犬病基因缺失疫苗毒株为载体的细小病毒基因工程疫苗处于临床试验阶段;用杆状病毒表达细小病毒VP2基因,形成病毒样颗粒,有望用于疫苗研究。
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