首页 > 分享 > 次氯酸作为防治宠物传染病的消毒剂的应用的制作方法

次氯酸作为防治宠物传染病的消毒剂的应用的制作方法

萌宠菠菠乐园
2024-12-28 01:47

1.本发明涉及宠物传染病消毒领域，特别涉及次氯酸作为防治宠物传染病的消毒剂的应用。

背景技术：

2.现有技术中，对引起犬猫不同传染性疾病的病毒存在环境进行消毒的采用的消毒剂分别是：
①
犬瘟热：季铵盐类(新洁尔灭、洗必泰、百毒杀等)、酚类(石碳酸、来苏儿等)；
②
犬细小病毒病：1：30次氯酸钠水溶液、福尔马林：
③
猫杯状病毒：过硫酸氢钾复合盐等；
④
猫瘟病毒：高浓度季铵盐、过硫酸氢钾复合盐、次氯酸钠水溶液等。
3.次氯酸是一种天然存在的、广谱、速效、低浓度时无毒的抗菌剂，相比以上几种杀菌剂而言，具有无刺激性、无毒、气味小等优点。其抗菌活性主要来源于其氧化性。由于次氯酸分子不带电荷且分子较小，能够迅速侵入细菌和病原体的细胞内外快速发生氧化作用，攻击诸如硫醇、硫醚、胺类、氨基酸、核苷酸、抗坏血酸、多烯酸等多种分子、破坏磷酸脱氢酶，使其新陈代谢失调而导致细菌死亡。
4.次氯酸由于其低刺激性、低毒性，广泛运用于家庭清洁消毒、医院空气消毒、空气消毒、养殖业、畜牧业等，但未见用于宠物传染病消毒和防治的报道。

技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种消毒性能好，安全、低刺激性的用于宠物传染病防治的消毒剂，解决了现有技术中针对宠物传染病的消毒剂刺激性较高、对病毒灭杀效果较差的技术问题，实现了刺激性低、对宠物传染病病毒杀灭消毒好的技术效果。
6.为了实现本发明的目的，本发明采用的技术方案是：
7.次氯酸作为防治宠物传染病的消毒剂的应用。
8.具体的，本发明提供次氯酸作为防治犬瘟热病毒、犬细小病毒、猫杯状病毒、猫瘟病毒的消毒剂的应用。
9.所述的次氯酸为浓度10～80ppm的次氯酸水溶液，优选为浓度50～70ppm的次氯酸水溶液。
10.进一步，所述应用的方法中，50～70ppm次氯酸对犬瘟热病毒、猫杯状病毒、猫瘟病毒的消毒时间为5～10min，对犬细小病毒的消毒时间为15～20min。
11.次氯酸稀释至10ppm仍然对病毒有杀灭作用，10～30ppm次氯酸对犬瘟热病毒、犬细小病毒、猫杯状病毒、猫瘟病毒的消毒时间为30～40min。
12.次氯酸作为宠物传染病消毒剂时，可用于养宠家庭以及宠物门店消杀工作。
13.进一步，所述次氯酸作为消毒剂应用时，使用方法通常为：将次氯酸装入喷雾器中，直接喷淋于物体表面或宠物身体，或者对环境空间进行雾化喷洒。
14.本发明研究探讨了次氯酸消毒液对于宠物(犬、猫)常见病毒的杀灭效果。参考消毒技术规范，对次氯酸消毒剂灭活犬猫常见病毒进行实验研究，结果表明：68ppm
±
15％浓
度的次氯酸消毒剂在室温作用1min可有效杀灭犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株，常温作用5min可使得犬瘟热病毒(cdv-11)、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株在细胞上完全失去感染性，作用15min使得犬细小病毒bj-81株在细胞上完全失去感染性；1：2和1：5稀释的次氯酸溶液常温作用30min可使犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株失去感染性，1：10稀释的次氯酸水溶液常温作用30min可使犬瘟热病毒(cdv-11)、猫杯状病毒bj-102株，失去感染性，不能完全杀死犬细小病毒bj-81株、猫瘟病毒bj-08株，但可使其感染性大大降低。
15.可见，次氯酸对于犬猫宠物常见的几种传染病毒(犬瘟热病毒、犬细小病毒、猫杯状病毒、猫瘟病毒)具有较好的杀灭效果，因此次氯酸消毒剂可作为消毒剂，用于宠物传染病消毒。
16.针对宠物传染病的防治，可采用次氯酸消毒剂，有效切断传染源。
17.本发明首次将次氯酸水溶液用于防治宠物传染病的消毒中，相比次氯酸盐消毒剂具有刺激性低、使用浓度低的优点，而且对宠物传染病毒有很好的杀灭效果。
附图说明
18.图1是次氯酸对犬瘟热病毒(cdv-11)杀灭效果对比图，且图1中，a图为犬瘟热病毒(cdv-11)感染bhk-slam细胞的对照组照片，b图为次氯酸水消毒剂与犬瘟热病毒(cdv-11)混合后感染bhk-slam细胞的照片。
19.图2是次氯酸对犬细小病毒bj-81株杀灭效果对比图，且图2中，a图为犬细小病毒bj-81株感染crfk细胞的对照组照片，b图为次氯酸水消毒剂与犬细小病毒bj-81株混合后感染crfk细胞的照片。
20.图3是次氯酸对猫瘟病毒bj-08株杀灭效果对比图，且图3中，a图为猫瘟病毒bj-08株感染crfk细胞的对照组照片，b图为次氯酸水消毒剂与猫瘟病毒bj-08株混合后感染crfk细胞的照片。
21.图4是次氯酸对猫杯状病毒bj-102株杀灭效果对比图，图4中，a图为猫杯状病毒bj-102株感染f81细胞的对照组照片，b图为次氯酸水消毒剂与猫杯状病毒bj-102株混合后感染f81细胞的照片。
具体实施方式
22.下面通过具体实施例对本技术技术方案做详细的说明，应当理解本技术实施例以及实施例中的具体特征是对本技术技术方案的详细的说明，而不是对本技术技术方案的限定，在不冲突的情况下，本技术实施例以及实施例中的技术特征可以相互组合。
23.实施例1
24.实验材料
25.次氯酸水消毒液(68ppm
±
15％)，由上海弗艾柏生物科技有限公司提供。犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所提供。bhk-slam细胞由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所构建及保存；f81细胞由北京畜牧兽医研究所保存；crfk细胞购自上海晶诺科技有限公司。dmem培
养基、胎牛血清、pbs、胰酶，购自thermo公司。
26.实验方法
27.2.1病毒tcid50测定
28.2.1.1犬瘟热病毒(cdv-11)tcid50测定
29.取生长状态良好的bhk-slam细胞铺设96孔细胞板。待细胞生长汇合至80～90％时，以dmem稀释各分离株第五代病毒液，以10倍比稀释10-1～10-10，每个浓度病毒液设置8个重复。弃细胞培养液，dmem清洗细胞一次，后每个浓度病毒液接种一列细胞，每孔100μl，同时设阴性对照。于37℃、5％co2培养箱中培养，逐日观察并记录结果，观察5天。计算tcid50(参照reed-muench法)。
30.2.1.2犬细小病毒bj-81株、猫瘟病毒bj-08株tcid50测定
31.取生长状态良好的crfk细胞铺设96孔细胞板。以dmem稀释犬细小病毒bj-81株、猫瘟病毒bj-08株病毒液，以10倍比稀释10-1
～10-10
，每个浓度病毒液设置8个重复。每个浓度病毒液接种一列细胞，每孔100μl，同时设阴性对照。于37℃，5％co2培养箱中培养，逐日观察并记录结果，观察5天。计算tcid50(参照reed-muench法)。
32.2.1.3猫杯状病毒bj-102株tcid50测定
33.取生长状态良好的f81细胞铺设96孔细胞板。待细胞生长汇合至80～90％时，以dmem稀释猫杯状病毒bj-102分离株病毒液，以10倍比稀释10-1～10-10，每个浓度病毒液设置8个重复。弃细胞培养液，dmem清洗细胞一次，后每个浓度病毒液接种一列细胞，每孔100μl，同时设阴性对照。于37℃，5％co2培养箱中培养，逐日观察并记录结果，观察5天。计算tcid50(参照reed-muench法)。
34.2.2次氯酸水消毒剂对病毒杀灭效果评价
35.取50μl次氯酸水消毒剂与50μl病毒原液等体积混合，对照孔为50μl dmem与50μl病毒原液等体积混合，充分混匀，室温静置30min后，加入细胞孔中，于37℃，5％co2培养箱中培养，逐日观察并记录结果，观察5天。
36.2.3测定次氯酸水消毒剂最短有效作用时间
37.将次氯酸水消毒剂与原始病毒液进行等体积混匀，涡旋30s后于室温下静置，分别设定消毒剂和病毒作用时间为0min、1min、5min、15min、30min和1h，测定消毒前后病毒滴度。
38.2.4不同浓度次氯酸水消毒剂对病毒杀灭效果评价
39.将次氯酸水消毒剂用pbs按照1:2、1:5、1:10稀释，取50μl次氯酸水消毒剂原液、1:2、1:5、1:10稀释液分别与原始病毒液进行等体积混匀，涡旋30s后于室温下静置30min，测定消毒后病毒滴度。
40.实验结果
41.3.1、病毒tcid50测定结果
42.参照reed-muench法，计算犬瘟热病毒(cdv-11)的tcid50为104。
43.犬细小病毒bj-81株的tcid50为105.5，猫瘟病毒bj-08株tcid50为104.67，猫杯状病毒bj-102株tcid50为105.57。
44.3.2、次氯酸水消毒剂对病毒杀灭效果评价结果
45.取50μl次氯酸水消毒剂与50μl病毒原液等体积混合，对照孔为50μl dmem与50μl
病毒原液等体积混合，充分混匀，室温静置30min后，加入细胞孔中。于37℃，5％co2培养箱中培养，观察并记录结果。结果显示与对照相比，消毒剂能很好抑制犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株在培养细胞产生的细胞病变。
46.如图1所示，接毒后5天，犬瘟热病毒(cdv-11)在bhk-slam细胞上产生了典型的合胞体病变，而加入50ul次氯酸水消毒液处理30min后再接种的细胞未出现合胞体病变，与对照细胞无明显差异。说明次氯酸消毒剂对犬瘟热病毒(cdv-11)具有明显的杀灭作用，且常温作用30min可使其完全失去感染性。
47.如图2所示，接毒后3天，犬细小病毒bj-81株在crfk细胞上产生了典型的细胞变圆、拉丝、脱落病变，而加入50ul次氯酸水消毒液处理30min后再接种的细胞未出现该病变，与对照细胞无明显差异。说明次氯酸消毒剂对犬细小病毒bj-81株具有明显的杀灭作用，且常温作用30min可使其完全失去感染性。
48.如图3所示，接毒后3天，猫瘟病毒bj-08株在crfk细胞上产生了典型的细胞变圆、脱落病变，而加入50ul次氯酸水消毒液处理30min后再接种的细胞未出现该病变，与对照细胞无明显差异。说明次氯酸消毒剂对猫瘟病毒bj-08株具有明显的杀灭作用，且常温作用30min可使其完全失去感染性。
49.如图4所示，接毒后2天，猫杯状病毒bj-102株在f81细胞上产生了典型的细胞变圆、脱落病变，而加入50ul次氯酸水消毒液处理30min后再接种的细胞未出现该病变，与对照细胞无明显差异。说明次氯酸消毒剂对猫杯状病毒bj-102株具有明显的杀灭作用，且常温作用30min可使其完全失去感染性。
50.3.3、测定次氯酸水消毒剂最短有效作用时间结果
51.将次氯酸水消毒剂与原始病毒液进行等体积混匀，涡旋30s后于室温下静置，分别设定消毒剂和病毒作用时间0min、1min、5min、15min和30min和1h，测定消毒前后病毒滴度。
52.表1.次氯酸水消毒剂处理前后病毒滴度测定表
53.名称0min1min5min15min30min1h犬瘟热病毒(cdv-11)10410
0.5
0000犬细小病毒bj-81株10
5.5
10
1.33
10
0.75
000猫瘟病毒bj-08株10
4.67
1010000猫杯状病毒bj-102株10
5.57
1010000
54.实验结果显示，次氯酸水消毒液在室温作用1min可有效杀灭犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株，作用5min可使得犬瘟热病毒(cdv-11)、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株再细胞上完全失去感染性。作用15min使得犬细小病毒bj-81株在细胞上完全失去感染性。
55.3.4测定不同浓度次氯酸水消毒剂杀灭效果
56.将次氯酸水消毒剂用pbs按照1:2、1:5、1:10稀释，取50μl次氯酸水消毒剂原液、1:2、1:5、1:10稀释液分别与原始病毒液进行等体积混匀，涡旋30s后于室温下静置30min，测定消毒后病毒滴度。
57.表2.次氯酸水消毒剂处理前后病毒滴度测定表
58.名称1:21:51:10犬瘟热病毒(cdv-11)000
犬细小病毒bj-81株00100.667猫瘟病毒bj-08株00100.333猫杯状病毒bj-102株000
59.实验结果显示，消毒剂1：2和1：5稀释后在室温作用30min可有效杀灭犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株使其失去感染性，稀释10倍，在室温作用30min可有效杀灭犬瘟热病毒(cdv-11)、猫杯状病毒bj-102株，使其失去感染性，但犬细小病毒bj-81株、猫瘟病毒bj-08株不完全杀死，但感染性大大降低。
60.次氯酸消毒剂是一种无色、透明、对人体无明显刺激性的消毒剂，且是《gb/t36758-2018含氯消毒剂卫生要求》标准中唯一可运用于粘膜的含氯消毒剂，可见次氯酸消毒剂的低刺激性。经过第三方检测机构鉴定本次研究的次氯酸消毒剂急性经口毒性为实际无毒级，一次完整皮肤刺激为0，进一步验证了本次研究的次氯酸消毒剂的安全性，说明了次氯酸消毒剂运用于宠物传染病防治上的的可行性。
61.根据微生物杀灭实验结果显示次氯酸水消毒液在室温作用1min可有效杀灭犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株，作用5min可使得犬瘟热病毒(cdv-11)、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株再细胞上完全失去感染性。作用15min使得犬细小病毒bj-81株在细胞上完全失去感染性。针对宠物传染病的防治，可完全运用本次研究的次氯酸消毒剂，保证传染源的有效切断。
62.本次研究的次氯酸消毒剂的稀释液(1：5的稀释液)在室温作用30min可有效杀灭犬瘟热病毒(cdv-11)、犬细小病毒bj-81株、猫杯状病毒bj-102株、猫瘟病毒bj-08株使其失去感染性，甚至1：10的稀释液对这四种病毒也有明显的杀灭作用，这说明了次氯酸消毒剂稀释液同样可运用于养宠家庭以及宠物门店消杀工作。
63.以上所述，仅为本技术的较佳实施例，并非对本技术任何形式上和实质上的限制，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本技术方法的前提下，还将可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本技术实施例所述的保护范围。凡熟悉本专业的技术人员，在不脱离本技术的精神和范围的情况下，当可利用以上所揭示的技术内容而做出的些许更动、修饰与演变的等同变化，均为本技术的等效实施例；同时，凡依据本技术的实质技术对上述实施例所作的任何等同变化的更动、修饰与演变，均仍属于本技术的技术方案的范围内。