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一种牛乳粉中猪源掺加物的一重／双重ＰＣＲ检测方法技术

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2025-01-06 23:11

本发明专利技术提供一种牛乳粉中猪源掺加物的一重／双重ＰＣＲ检测方法，属于食品生物技术领域。所用试剂包括Ｔａｑ酶、ｄＮＴＰ（脱氧核糖核苷三磷酸）、１０×缓冲液、ＭｇＣｌ２、灭菌水、引物和模板ＤＮＡ。按照如下步骤进行检测：对待测产品的ＤＮＡ模板进行提取、ＰＣＲ扩增及对扩增产物进行分析，从而判定是否有猪源掺加物，该方法的检出限为０．１％。本发明专利技术提供的方法可快速、准确地检测出被检样品中的猪源掺加物，以有效解决乳品企业现有的掺假检测漏洞，为实现从分子水平对牛乳粉质量的控制提供研究基础。本方法成本低、敏感性高、操作简便、耗时短，适用于食品质量和安全检测领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，是一种适用于牛乳粉中猪源掺加物的PCR扩增检测方法。
技术介绍
牛乳粉营养丰富，蛋白含量高质量优，受到消费者的喜爱。随着我国奶产业的快速发展，国内知名企业的竞争已将焦点集中到奶源的争夺上。少数奶农及一些不法商贩、甚至一些“无良企业”为了谋取暴利，常常在牛乳粉中掺假使杂，不惜危害消费者身心健康，甚至生命。以前常用的掺假物有水、食盐、芒硝、蔗糖、豆浆、米汤、防腐剂等。根据各种掺假物的理化性质进行相应的检验，可使掺假乳原形毕露。发展到后来则用动物(猪、牛、羊、鸡等) 或植物(大豆)水解蛋白来代替乳蛋白；利用植物脂肪(大豆油、菜籽油、玉米油等)及一些廉价的动物脂肪代替乳脂肪。由于理化检测方法存在检测对象单一、灵敏度低、易受外源因素干扰等缺点，无法准确、快速、高通量的进行区分鉴别。国标法对蛋白质检测则设备复杂，操作较繁琐，费用较高，耗时较长。
技术实现思路
本专利技术是为解决奶粉中猪源成分检测的化学方法存在灵敏度低，易受外源因素干扰等缺点，特别是目前食品中蛋白质、脂肪的测定方法不能将不同的动物来源区分开来的问题，进而提供一种适用于奶粉中的猪源掺加物的PCR检测方法。本专利技术解决其技术问题所采用的方案是一种牛乳粉中猪源掺加物的一重/双重PCR检测方法，首先对待测产品的DNA模板进行提取，然后采用牛特异性引物和猪特异性引物对提取的基因组DNA进行PCR扩增，同时对牛源DNA进行PCR扩增做为阴性对照组，对猪源DNA进行PCR扩增做为阳性对照组，然后对所有扩增产物分别进行琼脂糖凝胶电泳分析；最后根据被测产品孔出现的电泳带与阳性对照组和阴性对照组...

【技术保护点】
１．一种牛乳粉中猪源掺加物的一重／双重ＰＣＲ检测方法，其特征在于，首先对待测产品的ＤＮＡ模板进行提取，然后采用牛特异性引物和猪特异性引物对提取的基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，同时对牛源ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增做为阴性对照组，对猪源ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增做为阳性对照组，然后对所有扩增产物分别进行琼脂糖凝胶电泳分析；最后根据被测产品孔出现的电泳带与阳性对照组和阴性对照组进行比对，即可判定产品中是否添加了猪源掺加物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐伟丽，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：93