猪源肠球菌optrA和poxtA基因的检测、接合及遗传环境分析

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• 2025-01-06 23:11

【摘要】：[目的]optrA和poxtA均可导致肠球菌对噁唑烷酮类药物与酰胺醇类药物交叉耐药,给兽医及医学临床带来了巨大的挑战。本研究调查了optrA和poxtA基因在猪源肠球菌中的流行现状,并研究其水平传播机制。[方法]细菌分离鉴定,PCR检测,药物敏感性试验,细菌接合与电转化试验,PFGE及全基因组学测序等。[结果]在114株氟苯尼考耐药的猪源肠球菌中,optrA检出率为98.2%,poxtA检出率为57.9%,optrA+poxtA共阳性检出率为56.1%。optrA和poxtA可以单独发生转移,也可以发生共转移(1/6),接合效率为4.5±0.3×10~(-3)。optrA和poxtA也可以发生转化(3/5)。接合子和转化子的全基因组学测序获得两个质粒:～121kb的接合质粒(pE035)和～20kb的非接合质粒(pE076)。序列分析显示:(1) pE035为poxtA与optrA共阳性质粒,同时含有3个可移动遗传元件,分别携带dfrG、bcrABDR、aac(A)-aph(D)耐药基因,可介导大环内酯类、氨基糖苷类、噁唑烷酮类、酰胺醇类、四环素类、林可胺类、甲氧苄啶、杆菌肽锌耐药。反向PCR显示,3个可移动元件均可形成环状中间体,证实其具有活性,其中包括一个非常规环状结构(unconventional circularizable structure,UCS)。(2) pE076仅携带poxtA与fexB基因,可以介导酰胺醇类药物耐药。[结论]本研究首次在肠球菌中鉴定了optrA和poxtA共阳性接合质粒,同时该质粒存在的3个可移动遗传元件将加快optrA和poxtA共阳性接合质粒在肠球菌中的快速传播。

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