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一种猪源动物联合乳杆菌及其应用

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2025-01-06 23:16

一种猪源动物联合乳杆菌及其应用

本发明属于微生物，具体涉及一种猪源动物联合乳杆菌及其应用。

背景技术：

1、目前生猪养殖以玉米-豆粕型相对单一饲粮结构为主，其中玉米是饲料中的主要能量原料，豆粕是主要的蛋白质原料，通常以饲料中蛋白含量评价其营养高低。近年来随着生猪规模养殖的高速增长, 其养殖量约占世界总存栏量的一半，每年需要大量的饲料粮。针对目前养猪业存在的蛋白质饲粮短缺以及氮排放污染严重等问题，农业农村部提出大力推进玉米豆粕减量替代行动，低蛋白日粮和乳酸菌发酵饲料等技术受到了广泛的关注。如何能使低蛋白日粮保持动物生产性能不降低的同时，提高氮营养素的利用率，从而降低生产成本和减少氮排放量，并进一步促进养猪业的减排提效，是需要解决的技术问题。

2、动物联合乳杆菌（ ligilactobacillus animalis），曾用名动物乳杆菌( lactobacillus animalis)，是一种存在于发酵食品以及动物肠道或粪便中的乳酸菌，具有抑菌、抑过敏、改善肥胖和降低胆固醇等作用。目前有关动物联合乳杆菌的专利有：申请公告号cn 115024382 a，名称为“一株抗动物腹泻动物联合乳杆菌zjuids-r2及其应用”，该菌从健康宠物兔粪便中分离获得，具有较强的胆盐水解酶活力，可用于预防宠物腹泻；和申请公布号cn 115887507 a ，名称为“一种动物乳杆菌在制备抗肿瘤药物中的应用”的专利，涉及一株动物乳杆菌atcc35046在制备抗黑色素瘤药物中的应用。此外，申请公告号cn112753875 a，名称为“一种低蛋白无抗育肥猪饲料”，公开了一种含有枯草芽孢杆菌发酵构树饲料、复合酶制剂、有机铁复合剂和抗生素替代核心组合料等的低蛋白无抗育肥猪饲料配方。目前尚没有涉及猪源动物联合乳杆菌制剂的制备以及其与低蛋白日粮在猪生产中的应用报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种猪源动物联合乳杆菌及其应用，该动物联合乳杆菌是从低蛋白饲料饲喂的健康生长猪中筛选出性能优良的菌株，具有较强的耐酸、耐胆盐、黏附性强、高产乳酸等特性，对猪常见致病菌具有一定的抑制作用，对多种抗生素敏感。

2、为实现上述目的，本发明采用以下的技术方案为：

3、一种猪源动物联合乳杆菌，将该乳酸菌菌株于2023年3月22日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101）进行保藏，保藏名称为动物联合乳杆菌 ligilactobacillus animalis（zla031），保藏编号为：cgmcc no. 26855。

4、该猪源动物联合乳杆菌（cgmcc no.26855）为革兰氏阳性杆菌，单个或成对排列；在mrs平板培养基上的菌落为白色，圆形，表面湿润，不透明，边缘整齐。

5、进一步地，该猪源动物联合乳杆菌（cgmcc no.26855）还具有耐酸、耐胆盐、黏附性强、抑菌性好、高产乳酸等生物学特性：

6、1）该动物联合乳杆菌在ph=3的酸性环境中，作用2小时的存活率为70.34%，作用4小时的存活率为72.03%；在ph=4的酸性环境中，作用2小时的存活率为90.68%，作用4小时的存活率为107.63%。

7、2）该动物联合乳杆菌在0.05%的胆盐环境中，作用2小时的存活率为145.46%，作用4小时的存活率为177.62%；在0.1%的胆盐环境中，作用2小时的存活率为123.08%，作用4小时的存活率为111.89%。

8、3）该动物联合乳杆菌对caco-2细胞具有较强的黏附作用；猪源动物联合乳杆菌与caco-2细胞共同培养2小时，黏附指数为7.5 ± 0.3细菌/细胞。

9、4）该动物联合乳杆菌对3种猪常见致病菌（猪源大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌）有较强的抑制作用，可以有效控制动物疾病的发生。

10、5）该动物联合乳杆菌具有较强的产乳酸能力，在mrs液体培养基中培养32小时的乳酸产量达到168.53mmol/l。

11、如上所述的猪源动物联合乳杆菌在制备发酵饲料添加剂中的应用。

12、一种发酵制剂，优选地，所述发酵制剂为含如上所述的猪源动物联合乳杆菌。

13、如上所述发酵制剂的制备方法，其包括将猪源动物联合乳杆菌接种与液体培养基中进行发酵培养，其中液体培养基中的碳源为乳糖，氮源为牛肉蛋白胨，碳氮比为1:1，其他成分同mrs培养基，培养温度为33℃，培养时间为16~28小时，进一步优选为24小时。

14、进一步地，所述液体培养基的配方为乳糖20g/l，牛肉蛋白胨20g/l，乙酸钠5g/l，k2hpo4•3h2o 2g/l，柠檬酸氢二铵2g/l，mgso4•7h2o 0.58g/l，mnso40.19g/l，吐温-80 1ml/l，ph 6.5。

15、一种饲料添加剂，优选地，所述饲料添加剂为含如上所述的猪源动物联合乳杆菌的动物联合乳杆菌制剂。

16、如上所述饲料添加剂的制备方法，其制备方法包括将所述猪源动物联合乳杆菌接种在全价料中发酵获得。

17、进一步地，所述全价料为生长猪全价料，全价料与水按重量比为1：1混合，猪源动物联合乳杆菌的接种量按5.5×108cfu每kg生长猪全价料进行，发酵温度为34.5℃，培养时间为24小时，密封发酵。

18、如上所述饲料添加剂在猪产业中的应用。

19、如上所述应用，优选地，饲养猪时采用低蛋白日粮与饲料添加剂进行饲喂。

20、进一步地，饲料添加剂为低蛋白日粮的0.1%；

21、所述低蛋白日粮为粗蛋白含量为12.9%，所述饲料添加剂含总有效活菌数达到2.5×109cfu/g以上。

22、本发明的有益效果在于：

23、本发明提供的猪源动物联合乳杆菌（ ligilactobacillus animalis）zla031（cgmcc no.26855）是一株具有耐酸、耐胆盐、黏附性强、抑菌性好的菌种。由该动物联合乳杆菌制成的发酵饲料作为添加剂（活菌终浓度为2.5×109cfu/g）以0.1%的添加量添加到生长猪低蛋白饲料中，与常规蛋白含量饲料相比，生长猪日增重提高12.13%，料重比降低了9.99%；粪氮降低了31.19%，尿氮降低了14.70%，总氮排放量降低了22.49%，氮表观消化率提高了6.81%；粪便中乳酸菌活菌数量升高了171.15%，大肠杆菌数下降了74.14%，金黄色葡萄球菌数下降了71.02%；显著提高血清总蛋白、球蛋白和igg含量，显著降低血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性和尿素氮含量。由此可见，动物联合乳杆菌zla031作为饲料添加剂饲喂生长猪，能够抑制有害菌繁殖，调节肠道微生态平衡，具有增强机体免疫力、提高生产性能和减少粪氮排放的作用。

24、在低蛋白日粮的基础上配合使用猪源动物联合乳杆菌zla031制剂，有助于提高饲料的营养价值和营养物质的消化吸收，提高动物的生长性能，优化养殖环境，促进养猪业的减排提效，具有较好的经济价值。