广西部分地区猪源大肠杆菌分型及耐药性分析
大肠杆菌是引起猪腹泻的主要致病菌之一,给养猪业造成巨大的经济损失。已有研究表明,猪大肠杆菌病具有一定的地方流行性。为了解广西部分地区猪大肠杆菌的耐药性、毒力基因以及其遗传进化特点,本研究开展了以下试验:1、从广西南宁、桂林、来宾、柳州和玉林等地区规模化养猪场中采集腹泻猪的粪便拭子或者病死猪肠内容物,接种麦康凯和伊红美蓝等培养基。利用革兰氏染色观察、显微镜镜检和PCR等技术共分离并鉴定出116株大肠杆菌。通过药敏纸片法检测各猪场大肠杆菌分离株对临床常见药物的耐药性。结果显示:分离株对18种药物均呈一定程度的耐药性,对10种以上药物呈多重耐药的比例为98.28%(114/116),所选药物中大肠杆菌对多粘菌素最为敏感,耐药率为26.72%(31/116)。对分离到的多粘菌素阳性菌株进行了耐药基因检测,其中MCR-1检出率为35.48%(11/31)。2、利用PCR技术对116株大肠杆菌进行临床上常见的黏附素(987P、F18、F41、K88、K99)、肠毒素(LT、Sta、Stb)、志贺毒素(Stx2e、Stx1、Stx2)、溶血素(Hy1A)、致病岛(FyuA、irp2)和毒力岛(eaeA)15种毒力基因进行检测。结果表明99.13%的分离株携带毒力基因,irp2基因检出率最高(90.52%),其次是FyuA(75.00%)、Stb(49.14%)、eaeA(25.86%)、Hy1A(25.00%)、K99(15.52%)、K88(14.66%)、LT(11.21%)、F41(6.03%)、Stx2e(1.72%)、Stx2(1.72%)。未能检测出 Sta、Stx1、987P、F18基因。3、利用MLST分型方法对34株大肠杆菌进行遗传进化分析。结果显示:34株中10株属于新的ST型,剩下的24株属于ST361、ST10、ST410、ST100、ST1480和ST20... （共77页)
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