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婴儿型双歧杆菌防治小鼠过敏性哮喘及食物过敏的实验研究

萌宠菠菠乐园
2024-08-22 09:34

摘要：

第一部分婴儿型双歧杆菌防治小鼠过敏性哮喘的实验研究目的:研究婴儿型双歧杆菌(Bifidobacterium infantis,B.infantis)对过敏性哮喘的防治作用及相关免疫机制.方法:将40只BALB/c雄性小鼠随机分为4组:正常对照组,过敏性哮喘组,婴儿型双歧杆菌预防组和婴儿型双歧杆菌治疗组.过敏性哮喘组,预防组和治疗组在第7和14天腹腔注射卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,第22至28天以1%OVA雾化激发建立哮喘模型,建模同时预防组第0至14天灌胃婴儿型双歧杆菌,治疗组第15至28天灌胃婴儿型双歧杆菌.实验结束后,收集血清和肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF),完成BALF细胞计数和肺组织HE染色,ELISA法检测OVA特异性Ig E,Ig G1,IFN-γ,IL-4,IL-5,IL-13和IL-10的水平.结果:(1)过敏症状:过敏性哮喘组小鼠激发后出现打喷嚏,烦躁不安,食欲下降等症状,预防组和治疗组雾化激发后症状较轻.(2)肺泡灌洗液细胞计数:与过敏性哮喘组比较,婴儿型双歧杆菌的预防组和治疗组明显减少.(3)肺组织HE染色:过敏性哮喘组小支气管,肺泡内都有大量的炎性细胞浸润;预防组和治疗组肺组织炎性细胞浸润明显减轻.(4)血清OVA特异性抗体水平:过敏性哮喘组OVA特异性Ig G1和Ig E显著升高;预防组和治疗组OVA特异性Ig G1和Ig E均明显降低.(5)细胞因子水平:过敏性哮喘组肺泡灌洗液中IL-13和IL-4水平明显高于正常对照组,血清IL-10明显低于正常对照组,预防组和治疗组较过敏性哮喘组均明显降低(P0.05),过敏性哮喘组治疗组明显高于过敏性哮喘组,差异显著(P0.05).结论:(1)OVA过敏性哮喘组小鼠Th2细胞因子IL-4,IL-13增多,Treg细胞因子IL-10减少,发生Th2/Treg免疫反应失衡的过敏反应.(2)婴儿型双歧杆菌可以改善过敏症状,减轻过敏小鼠的气道炎症,降低OVA特异性抗体Ig E和Ig G1水平,其机制可能是通过抑制Th2细胞因子IL-4和IL-13的分泌,促进Treg细胞因子IL-10的分泌来调节机体的免疫平衡.第二部分婴儿型双歧杆菌防治小鼠食物过敏的实验研究目的:研究婴儿型双歧杆菌(Bifidobacterium infantis,B.infantis)对食物过敏的防治作用及相关免疫机制.方法:将40只BALB/c雄性小鼠称重,根据体重排序标号,分为四组:正常对照组,食物过敏组,婴儿型双歧杆菌预防组和婴儿双歧杆菌治疗组.食物过敏组,预防组和治疗组于第7,14和21天灌胃β-乳球蛋白(Beta-Lactoglobulin,BLG)致敏,第28天灌胃BLG激发1次.建模同时,预防组第1至21天灌胃婴儿型双歧杆菌,治疗组第22至28天灌胃婴儿型双歧杆菌.实验结束后计算增重结果,取小鼠空肠行HE染色,ELISA法检测总Ig E,IFN-γ,IL-4,IL-5,IL-13和IL-10的水平.结果:(1)小鼠症状:BLG致敏及激发后,食物过敏组出现食欲减退,体重减轻,毛发失去光泽;预防组和治疗组小鼠过敏症状不明显.(2)增重情况:食物过敏组小鼠体重减轻,预防组和治疗组体重增加,且治疗组高于预防组.(3)空肠病理HE染色:食物过敏组空肠上皮下出现严重炎症细胞浸润,肠粘膜上皮脱落;预防组和治疗组炎症细胞浸润程度减轻.(4)血清总Ig E水平:食物过敏组明显升高,预防组和治疗组较食物过敏组明显降低,治疗组低于预防组.(5)细胞因子水平:食物过敏组IL-4和IL-13水平均明显升高,预防组IL-4和IL-13明显降低,治疗组IL-13水平降低;食物过敏组IL-10水平降低,预防组,治疗组和食物过敏组比较差异不显著.结论:(1)BLG食物过敏小鼠Th2细胞因子IL-4,IL-13增多,Treg细胞因子IL-10减少,发生Th2/Treg免疫反应失衡的过敏反应.(2)婴儿型双歧杆菌可以降低血清总Ig E水平,减轻食物过敏小鼠空肠炎性浸润的程度,维持肠粘膜结构正常,其机制可能是通过抑制Th2细胞因子IL-4和IL-13的分泌来调节免疫平衡,而对调节性T细胞相关细胞因子IL-10作用不明显.

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