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鼠鼠界的极限救援:实验大小鼠的运输应激与解决方案

应激是机体对不协调状态或环境稳定受到威胁时所做出的反应。一般伴有神经、内分泌、免疫和行为的变化来完成身体对应激的应答[1]。导致实验大小鼠应激的原因有很多,如运输、饲养环境变化、实验操作等。今天,就让小赛带大家就实验大小鼠的运输应激展开讨论!

#1

导致实验大小鼠运输应激的主要因素

(1)运输时间长短:运输时间的增加可能会增加应激的累积效应。

(2)不同输运方式:如汽车陆运车厢内空气不流通、航空运输需要在无法控温的停机坪进行装卸。

(3)运输过程环境变化:如高温、噪声、振动、通风不良、运输笼盒中动物密度大等。

(4)动物自身原因:如孕鼠、老龄鼠、已实验造模的鼠等。

#2

实验大小鼠运输应激的常见表现

(1)体重减轻

举例1:短途运输后的Wistar大鼠体重迅速下降,体重丢失率随着运输时间的延长呈增大趋势(见图1)[2]。

图1 不同运输时间对体重的影响[3]

举例2:作者以676只3-9周的大小鼠为研究对象,在温控运输车内运输约24h,大、小鼠平均体重分别下降3.71%和0.9%。不同品系小鼠体重变化不同,C57BL/6小鼠变化最明显(平均下降4.69%),而ICR小鼠仅下降0.5%[3]。

图2 不同品系小鼠体重变化[3]

(2)行为变化

举例:如异常兴奋/翻转/转圈(见小鼠铲屎官养成记《旋转跳跃,我家小鼠居然会跳街舞!》

(3)大小鼠过热流涎

举例:大小鼠汗腺不发达,高温高湿环境下会出现唾液打湿嘴边毛发的现象。图中3只小鼠精神状态较差,嘴部周围毛发潮湿,明显是小鼠过热导致了流涎。

图3 小鼠过热流涎

(4)动物死亡

举例:航空运输时,为防止笼盒的通风滤膜被刮破,通常要求在笼盒上下分别加珍珠棉,此时笼盒主要通过两侧滤膜进行通风。下图中,为防止小鼠逃逸,在运输笼盒外还额外加了一层铁丝网,导致运输笼盒内通风不良,最终接收时整笼小鼠已死亡。

图4 运输笼盒内通风不良,小鼠死亡

除了以上能直接观察到的表现,还有一些不易观察的指标:

(5)生理参数(如心率、呼吸频率、血压、生理生化指标等)发生改变

举例:经历1.5h短途运输后的BALB/c和ICR小鼠的血糖、外周白细胞总数、血清皮质酮、白介素2和β-内啡肽等指标均出现下降,在常规饲养条件下自然恢复至少需要72h[4]。

(6)组织脏器出现病理损伤

举例:相关报道指出运输应激能导致小鼠小肠(十二指肠、空肠和回肠)[5]、肺脏[6]及免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)[7]等组织脏器出现不同程度的病理损伤。

(7)影响小鼠胚胎发育

举例:作者对14只孕中期(怀孕8~10 d)的小鼠进行约15h的长途运输,结果显示于对照组相比,运输应激组的活胎率下降和死胎率增加[8]。

#3

预防大小鼠运输应激&加快恢复的措施

(1)运输前对大小鼠进行全面的临床观察,确保动物健康。

(2)根据不同动物和不同运输方式选用合适的运输笼盒,若是汽车运送小鼠,可选用纸箱、类纸箱;若是大鼠发货或者航空运送小鼠,则需要铁丝笼+塑料盒配套使用。铁丝笼使用前仔细检查是否有凸出的倒刺,避免动物受伤。

(3)在运输笼盒中铺上足量的垫料、添加适量饲料和补水果冻,可根据需要添加环境丰富物,如纸条、窝料、红房子等。

(4)尽可能避免极端天气运输实验动物。若在高温天气运输大小鼠,尽量选择全程控温的动物运输专用车或晚上的航班进行运输,同时降低运输笼盒中的动物密度,并尽可能多的添加冰袋降温

(5)运输过程中,确保运输笼盒被妥善放置,尽量避免动物摔落、或因通风不良等意外的发生。

(6)动物到目的地后,尽快安排接收。若无法马上接收,则需要先通过观察窗确认动物状态,若动物状态较好可先将其暂放在安静且有空调的区域。

(7)动物接收时,可将原运输笼盒中的环境丰富物部分转移至饲养笼盒中,减少动物因环境变化引起的应激。不同笼盒/笼格来源的大小鼠,尽量不做并笼饲养,避免出现打架的情况。

(8)对运输后的大小鼠进行适应性饲养:如经历短途运输(1.5h以内)的实验大鼠至少恢复3天[2]。若经历长途运输,则应适当延长适应期,一般为5-7天。

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参考文献:

[1]周小江,邵青,张新创.观察分析不同环境因素对小鼠应激反应的作用[J].微生物学免疫学进展, 2013(02):33-36.

[2]杨斐.短途运输应激对实验大鼠和小鼠的影响及干预研究[D].复旦大学,2008.

[3]Lee S , Nam H , Kim J ,et al.Body Weight Changes of Laboratory Animals during Transportation[J].Asian Australasian Journal of Animal Sciences, 2012, 25(2).

[4]胡樱,杨斐.小鼠短途运输应激及其营养干预的研究[J].实验动物科学, 2012, 29(3):5.

[5]温宇婷,刘犇,章志涛,等.运输应激对小鼠肠道的病理损伤及Bcl-2和Bax表达的影响[J].中国畜牧杂志, 2020, 56(5):6.

[6]刘犇.运输应激对小鼠肺脏显微和超微结构及热休克蛋白表达的影响[J].中国畜牧杂志, 2018, 54(9):5.

[7]胡威,郑路程,易金鑫,等.运输应激对小鼠免疫器官结构及热休克蛋白表达的影响[J].湖南农业大学学报(自然科学版), 2021(005):047.

[8]李小娟.长途运输应激对孕中期小鼠胚胎发育的影响[J].中国畜牧杂志, 2019, 55(10):6.

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