1、动物营养研究技术动物营养教研室* *1 1动物营养研究的主要任务动物所需要的营养素研究并确定营养素的需要量饲料评定与饲料资源开发营养素的代谢及其调节研究动物营养与环境的关系寻求和改进动物营养的研究方法DateDate2 2动物营养学的研究内容营养物质的需要消化、吸收与代谢功能、缺乏、过量及中毒需要量确定DateDate3 3动物营养学的研究内容饲料营养价值评定或 养分生物效价的评定能量矿物元素维生素蛋白质、氨基酸DateDate4 4动物营养学的研究内容营养物质间的相互关系 与抗营养因子有毒元素有害物质颉抗物质DateDate5 5动物营养学的研究内容饲料资源的调查与开发利用动物营养代谢调控动物营养与环境和自然资源DateDate6 6动物营养实验的一般目的动物营养实验的主要目的在于验证某一个假设, 即研究一个或多个因素对一特定指标有无影响。 一个正确的试验设计可以使我们分离、补偿、消 除和考虑非试验因素的影响,这样一来,我们可 以从实验结果得出有关试验处理的有效结论。DateDate7 7影响营养试验结果的某些因素动动物因素环环境因素种类类、品种房屋遗传遗传栏栏舍年龄龄季节节体重温度
2、性别别光照生理状态态日粮生产阶产阶 段管理生产产水平试验试验 前的处处理动动物个体DateDate8 8一个试验应该包括3个阶段周密细致的试验设计 试验的实施阶段 对试验结果进行恰当的统计分析统计推断结论DateDate9 9试验设计的基本要素试验因素 受试对象 处理效应指标的关联性、客观性 灵敏性、精确性观测指标DateDate1010动物营养实验设计的基本原则重复的原则 随机化原则 局部控制的原则(减少误差)DateDate1111要 求 差异的唯一性 动物的代表性和随机化 环境的一致性 试验结果的重演性(重复、试验时间、数据 的收集与处理等)DateDate1212DateDate1313动物营养研究方法化学分析、物理测试 动物试验 其它:同位素示踪外科造瘘无菌技术DateDate1414化学分析饲料成分的分析 动物组织和血液成分的分析 动物粪便及成分DateDate1515饲料分 析 概略养分分析 Van soest 饲草分析方法 纯养分分析 动物排泄物(粪尿)及组织分析 抗营养因子和毒素分析 其他分析方法DateDate1616概略养分分析方 法饲料样品105烘干至恒重 水分
3、 干物质,DM550灰化至恒重灰分(Ash) 有机物OM凯氏定氮法粗蛋白质(CP) 无氮有机物乙醚回流浸提粗脂肪(EE) 碳水化合物稀酸、碱(1.25%H2SO4和 0.313mol/L NaOH分别处理 )粗纤维(CF) 无氮浸出物(NFE)DateDate1717概略养分分析法的缺陷 Weende 分析法仅能给出饲料中“粗养分”含 量的测定值,而未给出“粗养分”中各种具体营 养成分的含量。 在碳水化合物分析方法上存在不足,在的 测定过程中,酸处理使大部分的半纤维素水解 ,碱处理又使部分的木质素溶解,使得饲料中 粗糙的成分并未完全包括在中。从而加大 了无氮浸出物的计算误差。 CF并非化学上的一种物质,而是几种物质比例 不确定的混合物,同时也并未将饲料中的这几 种物质全部包括在其中。 DateDate1818范氏分析法饲草、粗饲料中性洗涤剂可溶物,NDS (蛋白质、脂肪、淀粉、糖)中性洗涤纤维, NDF(半纤维素,纤维素,木质素,硅酸盐)酸性洗涤剂可溶物,ADS (半纤维素)酸性洗涤纤维, ADF(纤维素,木质素,硅酸盐)72%硫酸,2030,3h酸性洗涤木质素, ADL (木质素,硅
4、酸盐)水解液 ( 纤维素)500 灼烧逸失物 ( 木质素)残渣 (灰分,即硅酸盐)2%十六烷三甲基 溴化铵,煮沸1h3%十二烷基硫 酸钠,煮沸1h范氏分析法原理示意图 DateDate1919纯养分分析 容量分析 比色分析 仪器分析(色谱分析、原子吸 收、荧光光谱分析、红外光谱分 析、核磁共振等)常 用 分 析 方 法DateDate2020例v高效液相色谱(HPLC)法是目前用于氨 基酸分析的常用技术 。这种方法的样品处理:一般用 6N HCl于 110水解24h。但这种处理法会使Cys遭 破坏 。Cys测定1) 二硫化物类试剂保护法 2) 过甲酸氧化法DateDate2121以回收Trp为目的的水解代替6N-HCl的是使用4N甲烷磺酸,按用盐酸加水 分解的方法让其分解。 分解后,由于不能减压干燥,加入4N-NaOH, 在 PH=2调节 在0.02N-HCI给一定的容量作样品 注意事项:1)甲烷磺酸是用1ml小玻璃瓶装入,由技术化学制品株式会社 出售,其组成是在4N甲烷磺酸中含有0.2% 3-(2-氨基乙烷)吲哚氮(杂)2)中和时的PH,使用PH试纸3)分析了20个被检体后,将分解柱
5、用再生液清洗4小时左右, 这是为除去从树脂中混入到试剂的吸附物质。4)对氢硫基乙烷磺也有效 DateDate2222以回收Cys 、Met为目的的加水分 解精确称量12mg样品 加入2ml过蚁酸,在0放置424小时 添加48%HBr 0.3ml 减压干燥 依从盐酸加水分解的方法,减压进行到干燥为止 加入1ml的0.2N-NaOH,放置1小时 在0.05 N0.1 NCHI,进行PH调制和给一定的容量 DateDate2323例v有效赖氨酸化学分析方法 。赖氨酸的-氨基与1-氟,2 ,4-二硝基苯反应。与2,4,6-三硝基苯磺酸 反应。DateDate2424动物排泄物(粪尿)及组织分析DateDate2525尿成分分析 尿中某些代谢中间产物或尾产物的水平,可能反映动物机 体某些养分的代谢或营养状况。如,叶酸缺乏则尿中亚胺甲基谷氨酸(FIGLV)排泄增加 ;烟酸缺乏,尿中N-甲基烟酰胺减少;B6缺乏,尿中黄尿 酸或犬尿酸含量增加又如,尿中3甲基组氨酸水平与体内蛋白质的分解代谢 正相关。DateDate2626近红外分析技术(NIRS)DateDate2727Broiler broodin
6、g system 育雏系统DateDate2828动物试验 生物效价:表观和真实消化率表观和真实利用率表观、真实沉积率(包括消化、代谢或平衡试验、饲养试验 ) 需要量研究综合法析因法DateDate2929饲料养分消化率测定DateDate3030消化试验体内消化试验 全收粪法 指示剂法 离体消化试验 消化吸收道消化液 人工消化液 尼龙袋法DateDate3131消化试验要点试验动物的准备及要求 测试饲料和日粮的准备 试验过程:预试期和正试期 样品收集和处理DateDate3232稻谷和糙米猪消化率测定采用套算法共选9头杂交公猪(平均体重为68.21.7 kg),其中3头 喂基础日粮(B),3头喂试验日粮S1(70%基础日粮 +30%稻谷),3头喂试验日粮S2(70%基础日粮+30%糙米 )。基础日粮组成如下(%):玉米 50.7,麦麸 15.0,次 粉15.0,豆饼16.0,食盐0.3,预混料3.0。预试期6d,收粪 期5d,每天取粪样的10%,加10%硫酸(每100g粪加10mL) 和甲苯数滴后于65烘箱中烘干。待全部粪样收齐后制样 分析。计算公式某养分消化率= 100(B-T)/
7、f +B 其中:T为试验日粮的养分消化率,B为基础日粮的养分消 化率,f为稻谷或糙米某养分占试验日粮养分的比例。 DateDate3333表2 基础日粮、稻谷和糙米的营养成分及计算的f值营养成分基础日 粮稻谷糙米稻谷的f值糙米的f值干物质88.2 87.887.00.3000.297粗蛋白14.238.110.30.1960.237粗纤维4.759.61.10.4640.090粗脂肪4.63.13.60.2240.251粗灰分5.54.31.50.2510.105有机物82.783.585.50.3020.307无氮浸出物59.362.670.50.3110.338总能16.1215.7816.360.2970.306DateDate3434表2 稻谷和糙米的营养分消化率(%)营养成分 基础日粮 稻谷日粮 糙米日粮 稻谷 干物质 80.96 75.93 82.37 64.19 85.71 有机物 82.98 77.40 84.33 64.50 87.38 粗蛋白 76.37 76.83 80.83 78.72 95.19 粗纤维 47.52 33.63 49.53 17.58 69.8
8、5 粗脂肪 60.38 64.05 63.67 76.76 73.49 无氮浸出物 89.05 88.05 91.46 85.83 96.18 总能 80.57 75.73 81.75 64.27 84.43DateDate3535反刍动物饲料蛋白质瘤胃降解 率的测定DateDate3636平衡试验(代谢试验) 物质平衡试验 能量平衡试验DateDate3737代谢试验消化试验仅考虑粪的营养分损失,而代谢试 验还需考虑尿和消化道气体中营养物质的损 失。 尿样的收集和处理DateDate3838代谢能的测定DateDate3939鸡表观代谢能(以糙米代谢能的测定为例)测定方法: 按鸡表观代谢能测定技术规程的方法进行。选用成年公鸡(体 重),饲养于代谢笼中,用配合饲料预饲一周,缝好集粪器,正式试验开 始前3天,在配合饲料中加大糙米的比例,整个试验期自由饮水。试验开始 时,先将实验鸡饥饿32小时,然后强饲糙米5080克,饥饿并收集32h排 泄物,待排泄物样集完后,加入10的硫酸(每100克加毫升)和 甲苯数滴,置于65烘箱中烘干,制样分析。 计算公式: 食入总能排泄物总能 表观代谢率 食入总能DateDate4040真代谢能测定采用快速测定法。 关键在于内源能的测定。须在上述试验饥饿时间基础上继续 饥饿,并收集排泄物。但一般采用“24h+24h”。食入总能(排泄物总能内源能)真代谢能(TME)采食量DateDate4141例表 稻谷和糙米的鸭代谢能结果计算表 (单位: 克, 千焦尔/克) 样品号 内源能组 稻谷组 糙米组排泄物重(风干) 能值 排泄物重(风干) 能值 排泄物重(风干,克) 能值 1 9.2 10.55 47.8 11.18 11.22 8.4
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