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常用的实验动物.ppt

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2024-09-26 22:09

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1、常用的实验动物,4.仓鼠（hamster）：特点：两颊有嗉囊，有很强的贮存食物的习性，牙坚硬，能够咬断铁丝。嗉囊内缺乏腺体和淋巴灌流，在其中植入异种组织不会引起免疫排斥，可用于肿瘤研究。常用种系：A/GY、Aa/GY、B/GY、C/GY等。,5.家兔（rabbit）：特点：有食粪癖（进食自己排出的、未落地的软粪），怕潮湿，喜食青粗饲料，喜磨牙，胆小易惊，对热源敏感（用于热源检测）。常用种系：日本大耳白、新西兰、青紫兰、中国本兔。,6.犬（dog）：特点：犬无色觉，听力、嗅觉极为灵敏，鼻尖发凉，汗腺极不发达，喜食肉类，唾液中缺乏淀粉酶。常用种系：Beagle，Labrador，四系杂交犬，自繁自

2、用。,7.猫（cat）：特点：喜孤独自由的生活，喜食鱼、肉类，瞳孔对光线敏感，实验中血压稳定。常用：几乎都是使用收购来的家养杂种猫。,8.禽类：鸡胚用作病毒培养；鸭用于肝炎病毒的研究。9.树（鼠句）：为原始灵长类，成年体重约为120150g，杂食，在生理上更接近于人类，可用作肝炎病毒、神经系统等的研究。,特种实验动物,1.免疫缺陷动物：这是一类由于先天性遗传突变或用人工方法造成的一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。常用的免疫缺陷动物有：裸小鼠、裸大鼠、性连免疫缺陷小鼠、Beige小鼠、严重联合免疫缺陷小鼠。,裸小鼠是一种先天性无胸腺无毛的裸体小鼠，其导致异常的基因(nu)位于11号染色体上。

3、带有纯合裸基因(nu/nu)的小鼠具有两个主要的缺陷特征：全身形似无毛，呈裸体外表。无胸腺，缺乏成熟的T细胞，因而细胞免疫功能低下，B细胞功能基本正常。,裸小鼠的应用：在微生物学方面：制作一些特殊病毒或细菌感染的动物模型，如麻风杆菌感染。在寄生虫学方面：用于制作一些寄生虫感染的动物模型。如：卡氏肺囊虫。肿瘤：可在裸小鼠腹腔内接种人的实体瘤，进行研究。根据裸小鼠的特征所作的其他应用。,裸大鼠的各种特征与裸小鼠相似，其应用也相似，只是其体积较大，操作较为方便，以及得到的标本量也较大。,性连免疫缺陷小鼠起源于CBA/N品系，又称CBA/N小鼠，基因符号为xid，位于X染色体上，纯合子雌鼠和杂合子雄鼠

4、表现为B细胞功能缺陷，即体液免疫功能缺陷，血清中的IgM、IgG含量降低。其病理与人类丙种球蛋白缺乏症相似，可用于这类疾病的研究。,Beige小鼠为NK细胞活性缺陷的突变系小鼠，其隐性突变基因(bg)位于第13号染色体，对化脓菌感染非常敏感。,严重联合免疫缺陷小鼠的隐性突变基因(scid)位于第16号染色体上，这种小鼠的外观与普通小鼠一样，体重发育正常，但胸腺、脾、淋巴结的重量一般均不及正常的30%，所有B和T细胞功能测试均为阴性，巨噬细胞、粒细胞、巨核细胞、红细胞、NK细胞和LAK细胞呈正常状态。,2.基因修饰动物：包括：转基因动物、基因敲除动物和克隆动物,动物实验的基本技术和方法,1.动物

5、的购买：到有供应许可证的单位购买并索取质量合格证明。根据实验时间，同时买入适量的饲料和垫料。如果从外地购买应考虑到运输因素对动物的影响，并查看运输检疫证明。买入的动物需要37天的适应观察。,2.实验动物的编号和标记染色法：常用的染色液有3%5%的苦味酸溶液（黄色）、2%的硝酸银溶液（咖啡色）、0.5%的中性品红溶液（红色）。穿耳法：用专用的耳穿孔器在耳朵的不同部位打孔表示编号。注意应避免孔口愈合，可使用消毒滑石粉涂抹在伤口处。标牌法：适用于较大的动物。,3.动物的麻醉,常用麻醉药,戊巴比妥,硫喷妥钠,(Mg/kg)/途径,(Mg/kg)/途径,小鼠 35 IV 25 IV 50 IP 50 I

6、P大鼠 25 IV 20 IV 50 IP 40 IP豚鼠 30 IV 20 IV 40 IP 55 IP家兔 30 IV 40 IP 20 IP,4.给药经口给药：灌胃是最常用的方法，用特制的针头进行，一般大鼠的灌药量为14ml、小鼠为0.21ml。皮下注射：这种方法较为简单，一般注射在背部，注射量为0.10.3ml/10g肌肉注射：一般注射部位选在肌肉较厚的后大腿内侧。腹腔注射：一般在腹部正中线两侧，腹股沟水平部位。静脉注射：大小鼠选择尾静脉；兔子选择耳沿静脉。,5.标本采集采血：可从尾尖、眼眶静脉丛、心脏等处采集。采尿：大小鼠用专门的代谢笼进行采集；大动物可用导尿法采集。,6.动物的安乐

7、死颈椎脱臼法：适用于大小鼠。空气栓塞法：适用于兔子、犬、猫、豚鼠。过量麻醉法：过量戊巴比妥钠腹腔注射。二氧化碳吸入法：将动物装入塑料袋内，再放入干冰或通入二氧化碳，扎紧袋口。断头法,新药的临床前研究,包括：药学研究：大体包括新药名称制定的原则、确证新药化学结构或组分的试验数据、制备的技术条件、理化常数、药品质量标准草案等。药理、毒理学研究：包括药效学、药代动力学和毒理学研究。,新药药理、毒理研究的基本技术要求：试验者应经过专门培训，技术熟练，操作准确，结果可靠。试验者应在实验记录上签字。课题负责人和研制单位的主管领导应随时检查工作质量，必要时还应接受药政部门的审查。受试药物和制备工艺应基本稳定

8、，应提供质量规格，并能与提供其他各项基础研究及临床研究用的药物保持同一质量标准。试剂应表明厂家和规格，应符合试验所需的等级要求。,实验动物应符合国家科委规定的等级动物要求，一般用成年动物，必要时可用特定年龄、性别的动物和特定的模型动物。实验仪器、设备应符合要求，写明厂家、规格。期校验，误差应在允许范围之内。实验设计应遵循科学研究的基本规律，按随机、对照和重复的原则进行设计。,实验记录要尽量采用客观的仪器记录，做到表格化。观察指标、记录时间、评判标准等均应通过预试验事先制订。多人参加记录时，应事先训练，统一掌握标准。实验出现末预见的现象时，应及时记录。实验中的差错应及时发现，发现差错后应立即在记

9、录中写明情况。原始记录至少应保存到药品上市后二年。7实验结果应经统计学处理。,新药的药效学研究内容包括：主要药效学研究一般药理学研究如果为复方制剂，还应做复方药理学研究。是研究药物对机体的作用。,主要药效学研究是指与该新药防治作用有关的主要药理作用的研究。应根据该新药的分类及药理作用特点进行。,主要药效学研究方法：新药的主要药效作用应当用体内体外两种以上试验方法获得证明，其中一种必须是整体的正常动物或动物病理模型。实验模型必须能反映药理作用的本质。,主要药效学的研究原则：观察指标应能反应主要药效作用的药理本质，应客观，能定量或半定量。给药剂量应做出量效关系，尽量求出ED50或有效剂量范围。

10、量效关系不明确的药物应说明原团。给药方法应采用拟推荐临床应用的给药方法。如该法在动物上无法实施时，应予以说明，改用他法。对照设定应有空白对照和已知标准阳性药物或治疗措施对照。,一般药理学研究是指对新药主要药效作用以外广泛药理作用的研究。采用产生主要药效作用的给药途径和其他可能采用的途径。采用产生主要药效作用的剂量及耐受剂量。尽量在清醒动物上进行，也可在麻醉动物上进行。一般药理学的观察指标应尽可能广泛些。,一般药理学研究应包括以下项目：精神神经系统：观察给药后动物的外表、毛发、姿势、步态等一般行为活动。观察给药后动物有无麻醉、催眠、镇静等现象，有无体位变化，对痛觉和对光反射活动是否正常，有无

11、肌颤、流涎、眼球震颤、瞳孔变化等现象。心血管系统：观察给药后动物心率、心律、血压等有无变化。呼吸系统；观察给药后动物呼吸频率和幅度有无变化。其他：根据不同药物的药理作用特点再适当观察其他系统的指标，创新药应尽量多观察一些。,复方药理学的研究通过一系列实验确定复方组成的依据及其合理性，明确复方组成药物在药效作用上的相互关系。在进行复方药理学研究前应先按主要约效学研究的要求选定模型及指标，进行研究。然后进行复方制剂中多种组份对药效或毒副作用影响的研究，以确定组份间的任何协同或拮抗作用，要有资料证明复方制剂在药效或毒副作用等方面具有一定的优点。,新药的药代动力学研究主要包括对吸收、分布及排泄的动力

12、学研究，是研究机体对药物的作用。,药代动力学的研究方法及内容：尽量选择与药效试验相同的动物。采用拟推荐临床应用的给药途径，在治疗剂量范围内用三种剂量做药时曲线，以明确是否有线性关系。提供初步数学模型及吸收速率常数、消除速率常数、Vd、Cmax、tmax、血浆清除率、t1/2等参数。,测定血浆蛋白结合率。分布试验至少测定心、肝、脾、肺、肾、脑、胃肠道、生殖腺、体脂、骨路肌等组织中的分布。排泄试验至少做尿、粪、胆汁中的排泄量。应写明化合物纯度。应用放射性标记化合物者，应写明放化纯度。应用定位标记化合物者，应写明标记部位。应结合层析等方法证明所测定的化合物是原型药物或代谢产物。,新药毒理学研究原则：包括全身性用药的毒性试验、局部用药的毒性试验、特殊毒性试验和药物依赖性试验。新药毒理学研究的目的是保证临床用药的安全有效，所以必须提供比较充分的毒性实验资料，在实验中应努力去发现毒性靶器官、毒性表现及防治措施。,