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犬类病原体的检测方法

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2024-10-05 02:43

首先，小编来给大家科普一下，犬类常见的疾病及诊断方式。犬类所有疾病中，犬瘟热病毒、狂犬病毒、犬细小病毒、犬冠状病毒、犬疱疹病毒占据犬类病原体疾病50%以上。目前市面上用的最多的是胶体金免疫试纸条法，通过检测抗原或抗体来诊断疾病，操作简单，5-10min内可以观察结果。但是试纸条检测有一定缺陷存在，容易出现假阴性和假阳性。发病初期，抗体水平尚未达到检测限，易出现假阴性；病情痊愈后，抗体依旧存在，检测结果出现假阳性。另外，检测结果为弱阳性时，表明可能会发病或者不发病，不能得到有效诊断，因此，该方法也遭到许多质疑。通过走访宠物医院我们发现，宠物医生普遍反应试纸条检测准确率太低，许多经经验判断或其他检测送检确诊的病例用试纸条检测，结果仍然为阴性，成为困扰宠物医生的头号问题。

近年来，直接检测病原体基因的分子诊断方法兴起，聚合酶链式反应（PCR）用于分子检测也逐渐占据疾病诊断市场，PCR检测结果灵敏度和特异性都高于试纸条，但是相对操作复杂，需要样品前处理、核酸提取、核酸扩增、检测等步骤，且需配备操作复杂的扩增仪和检测仪，需要专业的分子操作人员，无形中增加了检测难度和成本，不适合于一般的宠物医院使用。

新研发出新一代核酸分子检测技术-SEA，SEA产品直接对病原体基因检测，准确度和PCR相似，但是操作更为简单，可以在20min分钟左右通过肉眼比色或荧光即可判别结果，是一款介于PCR和试纸条之间的产品。

应用SEA技术产品检测样本可分为三步：

1）核酸裂解：将样本加入裂解液中，热裂解；

2）核酸扩增：在管中加入buffer A、buffer B 、buffer C和模板，上机扩增。

3）结果判读：通过颜色判读结果或机器直接打印报告。

同时本产品具有以下明显优势，优于市面产品：

1）多种靶标：国际首创的DNA/RNA一步法，检测结果更为准确；

2）等温检测：检测过程温度恒定，体系稳定；

3）成本更低：反应体系简单，无需复杂的仪器，成本有效降低50%以上。