宠物传染病生物制品 ;第一节 犬瘟热(CD) ;3、主要症状: ①呼吸道症状:表现为支气管炎、卡他性肺炎、咳嗽、气喘、呼吸困难。 ②神经症状:表现为癫痫、转圈、共济失调、肌肉强直痉挛等。 ③消化道症状:严重病犬腹泻水样粪便,恶臭,混有血液。 ④特征性症状:双相热型,少数病犬的鼻和足垫可发生角质化过度。;犬瘟热足掌角质化;犬瘟热全身抽搐;(二)、病原:CDV,只有一个血清型。 1、分类地位及形态结构特征:该病毒属于副粘病毒科副粘病毒亚科麻疹病毒属。病毒核酸为单股RNA,病毒粒子外观呈球形,大小直径150-200nm。核衣壳呈螺旋状立体对称。有囊膜,37℃时有的毒株可以凝集鸡的红细胞,只有一个血清型。 2、生长繁殖特征:适应鸡成纤维细胞的犬瘟热病毒在鸡胚上传100代后不致病可做疫苗。该病毒在犬、雪貂、犊牛肾、脾、肺、睾丸等细胞上都可生长,在乳地鼠和乳小鼠脑内可传代,也可用Vero细胞(非洲绿猴肾细胞株)培养。;二、疫苗与免疫: (一)疫苗:现用于犬的犬瘟热疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗。包括犬瘟热组织灭活疫苗、细胞培养灭活疫苗、雪貂组织活疫苗、鸡胚活疫苗、鸡胚细胞活疫苗和犬六联疫苗、犬七联疫苗。目前多使用六联疫苗和七联疫苗。;1、犬瘟热鸡胚细胞活疫苗:毒株为犬瘟热病毒鸡胚化弱毒株适应于鸡胚成纤维细胞的传代毒,用鸡胚成纤维细胞增殖病毒,制成弱毒疫苗。用以免疫犬和水貂,安全有效。欧美国家广泛用于水貂犬瘟热的预防。我国用于配制犬的六联疫苗或七联疫苗,广泛用于预防犬的犬瘟热。;制苗过程如下: (1)毒种:低温保存的毒种使用前经鸡胚成纤维细胞培养传2~3代。脑内接种1~2日龄小白鼠,最小发病量不低于10-3/0.03ml。15~20g小鼠脑内接种0.03 ml或皮下注射0.5 ml,观察10d无异常反应为合格。 (2)制苗:取9~11日龄SPF鸡胚制备鸡成纤维细胞,待细胞长成单层后按2.5%~3%比例将种毒接入维持液,37℃恒温培养。接毒后3~5d出现细胞肿大、聚集如星芒状、拉网变圆,脱落,当CPE达85%以上时,收获培养物,反复冻融3次,加入抗生素即成弱毒疫苗原液。加5%蔗糖脱脂乳冻干成冻干疫苗。 ;(3)疫苗???验:疫苗病毒毒价应达10-3.5/ml以上,安全检验时用16~18g小鼠4只,每只腹腔接种0.2ml;另用250~300g豚鼠2只腹腔接种0.5ml,观察10d应健活。 (4)保存与使用:冻干疫苗2~7℃保存,有效期2年。使用时,每只犬皮下或肌肉注射1ml,间隔2~3周加强免疫一次,保护期1年。;2、组织灭活疫苗: (1)制苗:犬瘟热病毒感染雪貂或犬发病,无菌采集病死犬肝、脾、淋巴结制成20%组织乳悬液,冻融三次,三层纱布过滤,加入终浓度0.1%甲醛,37℃灭活24h。 (2)疫苗检验:无菌检验按常规进行,安全检验用健康小犬2只,皮下或肌肉注射10ml,观察7d,无不良反应,判为合格。 (3)使用方法:每只犬皮下接种5ml,间隔2-3周加强免疫一次,免疫保护期3-6个月。 ;(二)免疫程序: 1、犬瘟热鸡胚弱毒冻干苗: 首免:9周龄刚断奶犬注射一针。 二免:15周龄加强免疫一次。 免疫期一年,以后每年加强免疫一次。;2、犬六联或七联苗: 首免:断奶(45-60日龄)幼犬注射1头份。 二免:首免后15天再注射1头份。 三免:二免后15天再注射1头份。 免疫期一年,以后每年免疫一次两针(首免1头份,15天后二免1头份)。;第二节 犬细小病毒病(CPD) ;③特征性病变: 表现为出血性肠炎和心肌炎。3~4周龄犬感染后以心肌炎为主,8~10周龄犬感染后以肠炎为主,先呕吐,后腹泻,拉出灰黄色或番茄酱样稀粪发出难闻的特殊腥臭味。;;;;;;2、病原:CPV。 该病毒属于细小病毒科细小病毒属。病毒核酸为单股DNA,病毒粒子大小直径20-22nm,病毒粒子外观呈足球形,蛋白质衣壳为20面体立体对称 ,无囊膜。该病毒在4℃和25℃能凝集猪和恒河猴的红细胞,但不能凝集其它动物的红细胞。可在犬肾、猫肾细胞上增殖并产生CPE。;二、疫苗和免疫: (一)疫苗:目前用于预防犬细小病毒病的疫苗主要有CPV灭活疫苗、CPV弱毒疫苗(犬细小病毒-犬钩端螺旋体二联疫苗、犬瘟热-CPV-犬传染性肝炎-副流感-犬钩端螺旋体五联疫苗、狂犬病-犬瘟热-CPV-犬肝炎-副流感-犬钩端螺旋体六联疫苗)。 ;1、CPV细胞培养灭活疫苗: (1)种毒:CPV-GN毒株。 (2)制苗:用CPV-GN种毒接种CRFK(猫肾细胞株)细胞,37℃培养24h形成单层后换入维持液,37℃继续培养72~96h,待CPE达80%以上时(HA≥1:1024),收获病毒,冻融3次,3000r/min离心15min,取上清,除去细胞碎片,上清加入终浓度0.25%甲醛,37℃持续搅
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