应用多联PCR对引发猪繁殖障碍有关病毒的检测 Ⅰ.JEV、PPV、PRRSV、PRV多联PCR引物设计
【摘要】：首先在 Gen Bank查出日本乙型脑炎病毒 ( JEV )、伪狂犬病病毒 ( PRV)、猪繁殖与呼吸系统综合征病毒( PRRSV)和猪细小病毒 ( PPV)基因组的所有已知序列 ,对各病毒基因区域进行同源性分析 ,结合各病毒基因组的结构特点 ,发现并确定了 PRV的 g H基因区、JEV的多聚蛋白基因区、PRRSV的结构蛋白区和 PPV的 VP2基因区为各自病毒保守序列。利用 Goldkey软件对上述保守的特殊序列进行引物设计 ,要求 G+ C含量 4 7%～ 6 0 %,长度 18～ 2 5bp,Tm值 72～ 85之间。对设计出的 4种病毒引物再用 VNTI30软件进行引物之间二级结构分析 ,以避免引物之间形成稳定的结构二聚体。选出扩增片段分别为 PRV 12 5bp、PRRSV2 6 3bp、PPV 313bp、JEV 375bp的 4对引物 ,并进行了每对引物扩增片段序列的同源性分析或互补性分析 ,以避免它们之间具有过高的同源性。最终确定了这 4种病毒的多联 PCR引物 ,从而为建立这 4种病毒的多联 PCR方法奠定了基础。
1 孙明,涂长春,李红卫,高显明,何旭玉,白晓鸿,余兴龙,殷震应用多联PCR对引发猪繁殖障碍有关病毒的检测 Ⅰ.JEV、PPV、PRRSV、PRV多联PCR引物设计[J];中国兽医学报;2000年01期 2 孙明,李红卫,高显明,涂长春,何旭玉,白晓鸿,金宁一,殷震应用多联PCR对引发猪繁殖障碍有关病毒的检测Ⅱ.JEV、PPV、PRRSV、PRV单项PCR检测方法的建立[J];中国兽医学报;2001年01期 3 刘志杰;曾智勇;汤德元;周莉;梁海英;肖超能;猪繁殖障碍病毒性疫病六重PCR检测方法的建立及应用[J];畜牧兽医学报;2012年09期 4 胡凌;王印;杨泽晓;姚学萍;林星宇;李桂黎;同时检测五种引起猪繁殖障碍的病毒的多重PCR的建立[J];中国兽医科学;2015年10期 5 曹洪志;李成贤;吴玉疆;二联PCR检测PPV和JEV混合感染的方法研究[J];猪业科学;2023年05期 6 刘胜利;刘玲玲;吕玉金;吴凤笋;李文刚;多重PCR结合基因芯片技术检测5种猪繁殖障碍性病毒病方法的研究[J];中国畜牧兽医;2019年05期 7 张焕容,肖驰,曹三杰,文心田猪伪狂犬病、猪细小病毒病及猪流行性乙型脑炎多重PCR诊断方法的建立[J];黑龙江畜牧兽医;2005年07期 8 李斌;赵硕;周英宁;赵武;蒋家霞;何颖;郭旋;卢冰霞;林昌华;秦毅斌;段群棚;全琛宇;许心婷;陈婷婷;许艺兰;陈忠伟;张宁;JEV、PRRSV、PPV及PRV多重PCR检测方法的建立及应用[J];动物医学进展;2023年03期 9 李睿;凤焱;孙亮;姜秋杰;呼延含荣;张秀森;程敏;郭利;赵立峰;猪库布病毒纳米PCR快速检测方法的建立[J];中国兽医科学;2024年03期 10 孙浩然;周浩;杨海涛;新冠病毒对蛋白酶药物产生耐药的分子机制[J];科学通报;2024年15期
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