7月25日,赛业生物生产中心模式动物部副经理严冬主讲「小鼠的生殖生理学特性及繁育挑战」线上课程,以下为本次直播常见问题汇总与解答。
FAQ:
1.如何采集基因编辑小鼠的乳汁?
2.如何配种,选择近交还是远交?
3.小鼠快速怀孕、提高产量的要点是什么?
4.如何知道小鼠怀孕了?怀孕大致天数?如何同时获得多个相似怀孕天数的孕鼠?
5.母鼠食崽的原因以及解决方法?
6.冻存小鼠胚胎进行留种的技术要点?
7.雄鼠会照顾幼崽吗?有必要将生产的雌鼠和雄鼠分开吗?
Q
如何采集基因编辑小鼠的乳汁?
A
选择生仔后5-7天的鼠妈最佳,将鼠妈与小鼠分开,分开4h后,腹腔注射催乳素,10min后保定孕鼠腹部朝上,用手轻捏奶头,挤出鼠奶,用移液枪吸取,可以操作多个乳头。
Q
如何配种,选择近交还是远交?
A
①远交系一定要远交,避免近交。
②近交系可以分为核心群,血缘扩大群,生产群,核心群1:1严格按照同胞兄妹配种,血缘扩大群1:2同胞兄妹配,生产群1:2随机配。
Q
小鼠快速怀孕、提高产量的要点是什么?
A
小鼠快速怀孕、提高产量的注意要点:
①周龄:成年小鼠,至少8周龄(2月龄)以后开始配种,2-6月龄繁殖旺盛期,适龄配种;
②留种:留种是选择外观正常、母性好、胎仔质量好的小鼠用于留种,种群质量会越来越好;
③营养:体重适宜,过轻或者过重的小鼠都不太适合繁殖,过胖精子质量差,难以完成爬跨和交配,过轻容易导致难产或奶水不足。
Q
如何知道小鼠怀孕了?怀孕大致天数?如何同时获得多个相似怀孕天数的孕鼠?
A
判断小鼠怀孕以及天数的方式:
①小鼠合笼次日检栓,见栓即代表有交配行为,但不代表一定会怀孕。
②早期怀孕从外观上看不出腹部隆起,怀孕10天小鼠肚子逐渐显怀,可以通过摸胎的方式确认是否怀孕,经验比较足的人员可以在7-9天就可以通过摸胎的方式确认。
获得多个相似怀孕天数孕鼠的方法:
①雌鼠足够多的情况下可以挑选发情鼠与雄鼠合笼,可以提高见栓率,从而获得同一怀孕天数的孕鼠;如果雌鼠有限,可以连续合笼检栓,即合笼次日检栓,见栓小鼠单独饲养,不见栓栓小鼠继续合笼次日检栓,连续合笼5天,可以获得怀孕天数相近的孕鼠。
②IVF+移植代孕鼠的方式,可以获得怀孕天龄相同的孕鼠。
Q
母鼠食崽的原因以及解决方法?
A
母鼠食崽的原因:
①光照太亮、噪声过大;
②生仔前受惊;
③小仔数量过少;
④出生小仔质量差或者过多;
⑤生仔后换笼导致气味变化;
⑥笼盒内没有遮蔽物;
⑦个体品系问题等。
如何避免母鼠食崽:
①光照保持在15-20Lx,操作时保证轻拿轻放;
②生仔前后3天尽量不要惊动孕鼠;
③出生后小仔尽量保证在4-5只左右为佳;
④怀孕鼠笼内添加环境丰富物(窝料和杨木丝);
⑤选种(选择优质的种鼠)。
Q
冻存小鼠胚胎进行留种的技术要点?
A
冻存小鼠胚胎进行留种的技术要点:
①自然合笼方式:雌鼠促排后与雄鼠合笼,次日检栓,见栓小鼠获取胚胎进行胚胎冻存;
②体外受精方式:雌鼠促排后取卵子与雄鼠精子进行IVF,获得早期胚胎进行胚胎冻存;
③小鼠周龄:无论自然合笼还是体外受精的方式,雄鼠至少8周以上(性成熟),有交配经验的雄鼠优先使用;雌鼠周龄根据促排适宜周龄(数量和质量)选择合适的周龄,特殊品系如珍贵品系、免疫缺陷品系等等优选9周以上小鼠促排自然合笼的方式,可以获得质量相对较好的早期胚胎进行冻存;
④胚胎类型:一般可以冻存受精卵、二细胞、囊胚;
⑤冻存条件:液氮冻存。
Q
雄鼠会照顾幼崽吗?有必要将生产的雌鼠和雄鼠分开吗?
A
①一般情况下,雌鼠和雄鼠交配后共同产生的后代,没有明显的打斗或异常行为,雄鼠会和雌鼠一起照顾后代,没有必要将雌雄鼠分开;
②如果雌鼠在与雄鼠合笼前已经怀孕,产生的后代雄鼠有一定概率的食仔和打架行为,需要分开饲养;
③日常有观察到小鼠有应激、密度过大等异常情况,需要将雌雄鼠分开饲养。
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