犬骨髓干细胞技术的研究进展
严玉霖 博士
北京京蒙科宠生物科技有限公司首席专家
美国堪萨斯州立大学兽医学院访问学者
一、犬骨髓干细胞的概念
从健康幼犬骨髓中分离的干细胞，包括两种干细胞：
骨髓间充质干细胞 ( Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)
骨髓多能造血干细胞 ( Bone marrow hematopoietic stem cells, BMHSCs)
骨髓间充质干细胞（BMSCs）
来源于中胚层，其细胞特性稳定，体外可帖壁生长，在连续传代培养和冻存后仍具有多向分化潜能
自然条件下BMSCs倾向于分化成所在组织的细胞，参与组织更新和损伤修复，BMSC s是理想的种子细胞来源之一, 在细胞替代治疗、基因治疗及组织器官再造中具有重要的临床应用价值
骨髓多能造血干细胞（BMHSCs）
是存在于造血组织中的一群原始造血细胞。也可以说它是一切血细胞（其中大多数是免疫细胞）的原始细胞，在体外具有悬浮生长的特性BMHSCs的移植、 免疫治疗、基因治疗和造血支持治疗等在恶性血液病、重症免疫缺陷及造血功能低下等领域具有广泛的用途
犬骨髓基质干细胞分泌因子：
①干细胞因子(SCF)
②成纤维细胞生长因子(FGF)
③内皮细胞生长因子(VEGF)
④表皮细胞生长因子(EGF)
⑤肝细胞生长因子(HGF)
⑥胰岛素样生长因子(IGF)
⑦粒细胞集落刺激因子(G-CSF)
⑧白介素(IL)
⑨抗炎因子；转化生长因子；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白
⑩各种溶菌酶等80余种活性物质
引自<<中国组织工程研究>> 2012,16(6): 1125-1128.
二、犬骨髓干细胞的治疗原理
疾病治疗的三个时代：药物治疗→基因治疗→细胞治疗
分化作用：干细胞治疗是通过干细胞移植来替代、修复患犬损失的细胞，恢复细胞组织功能，从而治疗疾病
原理：
旁分泌作用：干细胞能够分泌大量的细胞因子，以间充质干细胞为例，其分泌因子在功能上主要可分为免疫调节、抗细胞凋亡、血管发生、支持干/祖细胞的增殖与分化、化学趋化、抗瘢痕六大类
通过自分泌或旁分泌的方式，改善机体局部微环境，促进内源性干细胞向伤口部位的迁移和分化，挽救濒临凋亡的细胞，从而达到修复组织的目的
犬骨髓干细胞治疗的特点:
低毒性（或无毒性），一次性介入，永久性治疗
不需要完全了解疾病发生的确切机理
到组织器官最需要的地方去，调节机体内环境的稳态，增强机体免疫力
同种异体治疗时免疫排斥反应较小
对于个别体质敏感犬可应用自体干细胞移植，避免产生排斥反应
三、犬骨髓干细胞研究进展
技术合作与支持
犬干细胞技术在美国宠物医院的应用已经普及
京蒙高科强大的技术研发和生产平台
犬骨髓干细胞的分离培养
犬骨髓干细胞的流式细胞术鉴定
流式细胞术鉴定周期结果显示：G1、S、M、G2期细胞所占比例分别为7.0%、25.6%、15%、52.4%(图2A)，表明多数细胞处于活跃的增殖期，显示出慢周期性和自我更新能力。
流式细胞仪检测骨髓干细胞的表面抗原特性结果：强表达CD44阳性细胞率98.6%、HLA2DR阳性率为1.37%、CD34阴性、CD11a阴性，符合骨髓干细胞的分子生物学特性(图2B)。
国内首例拥有自主知识产权的犬用干细胞专利
四、京猛科宠犬用干细胞相关系列产品
瑞格纳－外用（干细胞分泌因子修复液）
瑞卫特－注射用（干细胞组织修复因子注射液）
普优特－移植用（犬骨髓干细胞）
五、骨髓干细胞在犬保健中的应用范围
用于加速术后的康复和痊愈
用于衰老和体弱的犬，增强体质
用于帮助外来犬种对本地环境的适应
用于增强疫苗的免疫效果
提高生活和健康质量
用于外源性创伤的愈合
六、犬骨髓干细胞的治疗范围
白细胞减少症
骨关节炎、软骨损伤
急性肝/肾功能损伤
皮肤修复
神经系统修复（治疗瘫痪、脊髓损伤）
角膜修复
心肌梗死
Ⅰ型糖尿病
犬干细胞的研究与应用如同黎明前的曙光！
七、致谢
美国堪萨斯州立大学兽医学院/教学实习医院
北京京蒙高科生物科技有限公司
北京京蒙科宠生物科技有限公司
云南农业大学动物科学技术学院/动物医院
公安部昆明警犬基地
西南大学教学实习医院/昆明爱美森宠物医院
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