首页 > 分享 > 实验动物操作技能

实验动物操作技能

萌宠菠菠乐园
2024-10-30 17:10

通过动物行为学实验，我们可以评估小鼠的学习记忆能力、焦虑情况、抑郁情况、恐惧情况、社交情况、运动能力等。

小鼠行为学实验分类

1、学习记忆行为实验：

学习是神经系统接受外界环境变化后获得新行为和经验的过程，记忆是指对学习获得的经验或行为的保持，包括获得、巩固、再现及再巩固等环节。学习记忆行为实验可用来评估小鼠的学习能力、记忆能力，可通过横向、纵向比较获得不同变量影响下或不同时期的小鼠学习记忆能力。常见的实验包括迷宫实验（Morris水迷宫、T迷宫、Y迷宫、巴恩斯迷宫等），新物体识别，条件性恐惧( fear conditioning，FC) 实验等。

2、情绪行为实验：

情绪行为是一种瞬时变化的心理与生理现象，反映了机体对不断变化的环境所采取的适应模式。从心理学的层面来说，情绪是对客观事物的态度体验和行为反应，为人和动物所共有，主要包括抑郁、焦虑、恐惧三类行为。由于动物的情绪体验难以用语言表达，行为实验是其主要的评价方法。主要包括：旷场实验（ open field）、强迫游泳（ forced swimming）、悬尾实验、糖水偏好实验、高架十字迷宫、旷场实验等。

3、运动行为实验：

运动行为实验可用于评估小鼠的自发活动情况、运动协调能力、平衡能力、耐力等。常见的实验方法包括旷场实验（ open field test），滚轴实验( rotarod test），平衡木实验，握力实验等。

实验室常用的行为学实验

1、旷场实验（open field test）：

是一个常用的动物行为学实验，可以检测小鼠自发活动行为和探索行为，是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。

实验在安静的环境下进行。将动物放入箱内底面中心，同时进行摄像和计时。观察一定时间后停止摄像，观察时间可根据实验拟定。一般为3～10 min。

分析数据时，将箱子底面虚拟划分为中心区域和外周区域（一般为4:12，或者1:8），通过轨迹分析小鼠进入中心区域的次数、在中心区域停留时间、运动总距离等，评估小鼠的焦虑抑郁状态、自主运动能力。

2、Morris水迷宫：

Morris水迷宫实验主要测定空间学习记忆能力，主要的实验内容有隐蔽站台试验、空间探索试验、反向试验和可视站台试验等。

（1）隐蔽站台实验

小鼠第一次游泳时，一般不会找到藏于水面下的不可见的站台。入水游泳60～90s以内仍未能找到水池中的站台或未能爬上站台时，实验人员可将小鼠引导置于站台上站立10～30s，使小鼠体会站在站台上的感觉，这样从第二次开始，学习成绩就能迅速提高。小鼠爬上站台后，让小鼠在站台上站立5～10s。将小鼠从站台上拿下来，休息30～60s以后再进行下一次训练。在一般情况下，正常小鼠很快就能学会以最快最佳的轨迹搜索到站台的确切位置。

每天开始时，将小鼠任意从四个象限（东北、西北、东南、西南）之一面向池壁放入水中，站台放置于东南象限，每次实验鼠共游泳60～90s来寻找隐藏的站台。如果成功地找到站台，鼠可以得到在站台上的10～30s休息时间；如果60～90s内未能成功的找到站台，就由实验人员将鼠人工置于站台上，且同样给予10～30s的休息时间。有时鼠可能会在10～30s间隔时间到达之前从站台上掉下或跳入水中继续游泳。一旦这种情况发生，则将鼠重新放回站台，并重新计时，使时间间隔到达（10～30s）。这样可以确保每只鼠在每次实验后有相等的时间来观察和获取空间信息。

（2）空间探索实验

隐蔽站台试验结束24h后，撤除站台。然后任选一相同入水点将鼠放入水中，记录鼠在60s或120s内的游泳路径，记录鼠在原站台象限的停留时间和穿越原站台次数，观察受试鼠的空间定位能力，及在空间探索过程中的变化规律。在电脑屏幕上用圆形环标记出站台原所在位置，这样可以记录穿越原站台所在位置的次数。

3、新物体识别实验：

在进行测试或训练前24小时，将动物放在测试的房间内，适应测试环境。

开始训练时，将A，B两个物体放在场地一侧壁的左右两端，小鼠背朝两物体放入场地内，并且小鼠鼻尖距离两物的长度要一致。放入后，开启录像设备，实验者离开测试房间，记录小鼠与这两个物体接触的情况，包括鼻子或嘴巴触及物体的次数和距离物体2-3cm范围内探索的时间（前爪搭在物体上、鼻子嗅物体、舔物体等均属探索物体，爬到物体上不动不能算是对新物体的探究）。

探索一段时间后，将小鼠移出休息。后将B物体替换为C物体，重复上述操作。小鼠对新旧物体的探索的次数、时间和距离，可用于评估小鼠的认知情况：若小鼠认知能力差，则在新旧物体的探索无差异；若小鼠认知能力正常，则对新事物的探索较旧事物长。认知指数(recognition index ,RI) 计算公式为：RI = 新物体 / (新物体 + 旧物体) ×100 % 。

4、条件恐惧实验：

用于小型啮齿类动物（大、小鼠）环境相关条件性恐惧实验研究。啮齿类动物在恐惧时会表现出特有的凝滞状态（ Freezing ），动物在这种情况下倾向于保持静止不动的防御姿势。小鼠在遭受电击时，会表现出凝滞状态。

实验分为训练和测试两阶段。训练阶段（第一天），将小鼠放入条件恐惧箱，记录这最初2min内动物的凝滞时间作基线。接着加入条件声音，再给予电击，完成一轮训练。如需要多轮训练，则重复上述操作。记录整个训练阶段动物凝滞时间，用以测量动物的非条件恐惧（unconditioned fear）。将小鼠移开操作箱。消除气味等信息，以备进行下一批动物的训练。

5、糖水偏好实验：

甜味剂也能给小鼠带来欣快感。糖水偏好实验是反应快感是否缺失的一种检测指标，快感缺失指的是对奖励刺激缺乏兴趣，这是一种情感障碍(包括抑郁症)的表现形式。蔗糖偏好实验包括两个部分，分别为适应训练部分和测试部分。在训练中，老鼠在前24h每笼放入两瓶蔗糖溶液，紧接着24h将其中的一瓶换成纯水，适应结束后，禁食禁水一段时间。测试阶段，小鼠只能选择事前称量好的两个瓶子，一瓶为1%（w/v的蔗糖溶液，另一瓶为纯水，禁食，12h 后，取走两瓶并称重，记录小鼠的总液体消耗，糖水消耗和纯水消耗。期间需调换两瓶的位置以消除位置影响。糖水偏好指数％＝糖水消耗量／（糖水消耗量＋纯水消耗量）×100％。

6、高架十字迷宫(High plus maze）：

高架十字迷宫是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐惧形成矛盾冲突行为来考察动物的焦虑状态。

高架十字迷宫具有一对开臂和一对闭臂，啮齿类动物由于嗜暗性会倾向于在闭臂中活动，但出于好奇心和探究性又会在开臂中活动，在面对新奇刺激时，动物同时产生探究的冲动与恐惧，这就造成了探究与回避的冲突行为，从而产生焦虑心理。

实验开始时将小鼠从中央格面向闭合臂放入迷宫，记录活动情况。观察指标包括：开放臂进入次数，开放臂停留时间，闭合臂进入次数，闭合臂停留时间。计算开放臂停留时间比例，开放臂进入次数比例，高架十字迷宫中总进入次数。进入开放臂次数及停留时间与小鼠的焦虑情绪成负相关，进入开放臂次数越少，停留时间越短，说明老鼠的焦虑情绪越严重。

7、强迫游泳实验（Forced Swimming Test，FST）：

强迫游泳实验是一种行为绝望实验法，通过将动物置于一个局限的环境中（如水中），动物在该环境中拼命挣扎试图逃跑又无法逃脱，从而提供了一个无可回避的压迫环境，一段时间后，动物即表现出典型的“不动状态”，观察并记录实验动物产生绝望的不动状态过程中的一系列参数，可以用来评价抑郁状态。

8、平衡木实验：

检测小鼠运动能力的方法有很多，如转棒实验、爬杆实验、斜坡实验、动物步态实验、强迫跑轮实验、小动物跑步机实验、抓力（握力）实验、平衡木实验等。平衡木实验用于检测小鼠平衡能力、肌力以及运动协调力。平衡木的形状主要分为长形和方形，以方形居多，平衡木常用尺寸为长1m，直径17mm的圆形平衡木或者长1m，宽度14mm的方形平衡木。平衡木一侧放置在黑色方盒内，将小鼠放置在平衡木另一侧。记录小鼠在60s内通过平衡木进入黑色方盒内的时间和打滑次数。实验分为训练期和测试期，为期3天。

TAG标签：

美凤力借多年的大动物经验，坚持以“务实求真”为宗旨，累计为4000多家客户提供品质大动物临床前服务，得到了客户的一致好评。如果您有动物试验、临床培训、组织病理、大动物试验、临床试验、产品注册科研课题等...
请立即点击咨询我们或拨打咨询热线： 17312606166，我们会详细为你一一解答你心中的疑难。添加好友