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动物模型与评估丨啮齿动物埋珠实验注意事项

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2024-09-03 16:08

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埋珠实验（Marble Burying Test）是一种常用的行为学测试，用于评估动物的焦虑样行为、强迫样行为以及清洁行为。在该实验中，动物被放置在一个装有珠子的笼子里，观察一定时间内动物埋珠子的行为，在这个测试中，如果珠子的表面有三分之二被垫料覆盖，它就被记为被埋藏。

实验步骤

放置鼠：将一只鼠放置在装有珠子的笼子角落，注意将鼠放在尽可能远离珠子的垫料上，并盖上笼子的过滤顶盖。在测试期间不提供食物和水。

测试过程：让鼠在笼子中安静地待30分钟，期间不要打扰它。

移除鼠：测试完成后，将鼠从笼子中取出并放回它的家笼，在此过程中要非常小心，不要移动或使珠子移位。

评分：由不知道鼠处理条件或基因型的研究人员来统计埋藏的珠子数量。如果珠子表面面积的三分之二被垫料覆盖，则将其记为被埋藏的珠子。然后计算每只鼠埋藏珠子数量的平均分。

回收珠子：从垫料中取出全部20个珠子。处理掉垫料。

在鼠埋珠实验中，区分鼠是真正地埋珠还是仅仅是踩踏珠子是很重要的，因为这两种行为可能反映不同的心理状态。

判断鼠是在埋珠还是踩珠方法：

观察行为特征

1. 埋珠行为：

鼠用前爪抓取珠子，将其推向床材中。

鼠用鼻子推动珠子进入床材。

鼠用身体挤压珠子，使之陷入床材。

2. 踩珠行为：

鼠只是简单地走过珠子上方，没有明显的抓取动作。

鼠没有表现出特别的兴趣，只是在寻找食物或其他物体时无意中踩到珠子。

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分析：

1. 视频记录：实验过程中全程录像，以便后续详细分析鼠的行为。

2. 行为评分：观看视频时，记录鼠的每一个行为，特别是那些明确涉及埋珠的动作。区分哪些是真正的埋珠行为，哪些是踩踏行为。

3. 时间记录：记录鼠在每个珠子周围花费的时间，以及是否有明显的埋珠动作。

4. 珠子位置：检查珠子的位置变化。如果珠子被移至床材之下，则很可能是被埋藏的。

5. 床材移动：注意床材是否被鼠移动，这通常是埋珠行为的一个指示。

6. 重复观察：多次观察同一段视频，以确保正确识别行为。

数据处理：

记录实验开始和结束的确切时间，记录鼠的行为，包括埋珠子的数量、频率等。计算实验期间鼠埋掉的珠子总数，计算各组的平均埋珠数及其标准差。分析埋珠行为与其他行为测试之间的相关性，比如与旷场测试或强迫游泳测试的结果进行相关性分析。高埋珠数可能表示鼠表现出更多的焦虑样或强迫样行为。比较不同处理组之间的差异，以确定特定药物或处理是否影响了鼠的行为。

Fig1 鼠埋珠行为实验的观察结果示例

A, 珠子的位置几乎没有变化。B&C珠子从原始位置有广泛的位移，垫料表面的状况也表明了埋藏和挖掘行为

注意事项：

1. 床材选择：使用易于观察珠子移动的床材，如浅色的木屑或沙子。

2. 珠子尺寸：选择大小适中的珠子，太大或太小的珠子可能会影响鼠的行为。

3. 实验环境：确保实验环境安静，没有干扰鼠注意力的因素。

文献引用：

Thomas A, Burant A, Bui N, Graham D, Yuva-Paylor LA, Paylor R. Marble burying reflects a repetitive and perseverative behavior more than novelty-induced anxiety. Psychopharmacology (Berl). 2009 Jun;204(2):361-73.

Angoa-Pérez M, Kane MJ, Briggs DI, Francescutti DM, Kuhn DM. Marble burying and nestlet shredding as tests of repetitive, compulsive-like behaviors in mice. J Vis Exp. 2013 Dec 24;(82):50978.

Chamberlain, S. R., Blackwell, A. D., Fineberg, N. A., Robbins, T. W. & Sahakian, B. J. The neuropsychology of obsessive compulsive disorder: the importance of failures in cognitive and behavioural inhibition as candidate endophenotypic markers. Neurosci. Biobehav. Rev.29, 399-419.

McGuire, J. F., Lewin, A. B., Horng, B., Murphy, T. K. & Storch, E. A. The nature, assessment, and treatment of obsessive-compulsive disorder. Postgrad. Med. 124, 152-165.

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